
- Kudos
- Ihonalainen sidekudos, löysä sidekudos ja rasva, normaali
- Synonyymit
- A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B
Asiakirjat
A9
Cell line · Tuotenumero 305166
A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...
Räätälöinti / Suositukset
- A9Cell line€550.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
A9-solut ovat hiiren rasvakudoksesta peräisin oleva fibroblastien kaltainen solulinja. W. R. Earle perusti ne L929-alkukannan alaklooniksi vuonna 1940. Emokanta saatiin urospuolisen C3H/An-hiiren normaalista ihonalaisesta areolaarisesta ja rasvakudoksesta.
Näiden solujen huomattava ominaisuus on, että ne ilmentävät adenosiinifosforibosyylitransferaasia (APRT) ja hypoksantiinifosforibosyylitransferaasia (HPRT), joita kutsutaan nimillä APRT+ ja HPRT+. Nämä solut ovat olleet arvokkaita virustutkimuksissa, joissa on käytetty erityisesti pseudorabies-virusta (PRV), Indiana-kannan vesicular stomatitis -virusta (VSV) ja herpes simplex -virusta (HSV).
A9-solujen herkkyys ja vaste näille viruksille on tehnyt niistä hyödyllisiä virusten replikaation, patogeneesin ja mahdollisten viruslääkkeiden tutkimisessa. Immunologiassa A9-soluja käytetään useilla tutkimusalueilla. Ne ovat arvokas malli immuunivasteiden, vasta-ainetuotannon, monoklonaalisten vasta-aineiden tuottamisen ja hybridoomateknologian tutkimiseen.
Koska A9-solut lisääntyvät nopeasti (kaksinkertaistumisaika on noin 24 tuntia), ne tarjoavat riittävän soluvarannon kokeita ja jatkokäyttöä varten. A9-soluilla on fibroblastien kaltainen morfologia ja ne tarttuvat viljelyalustaan. Eläinsoluiksi luokitellut ja hybridoomasolutyyppiin kuuluvat A9-solut on muodostettu fuusioimalla Mus musculus -lajin (hiiri) B-lymfosyyttejä ja saman lajin myeloomasoluja.
Tämän ainutlaatuisen yhdistelmän ansiosta A9-soluilla on sekä B-lymfosyyttien että myeloomasolujen ominaisuuksia. Kaiken kaikkiaan A9-solut ovat vakiintunut fibroblastien kaltainen solulinja, jota käytetään virusinfektioiden, erityisesti PRV:n, VSV:n ja HSV:n, tutkimiseen ja immunologiaan.
- Kudos
- Ihonalainen sidekudos, löysä sidekudos ja rasva, normaali
- Synonyymit
- A-9
- A9 (Hamprecht)
- A9(Hamprecht)
- AG 9
- GM00346
- GM-346
- GM346
- GM00346B
02Luokittelu
- Organismi
- Hiiri
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Fibroblastien kaltaiset
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, alastomilla hiirillä.
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- A9 (Cytion-tuotenumero 305166)
- NCBI-verotunnus
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3984
05Ilmentyminen ja alttius
- Antigeenin ilmentyminen
- H-2k
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Rotua / alalajia
- C3H/An
- Luovuttajan ikä
- 100 päivää
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä