
- Tissue
- 皮下结缔组织、松弛结缔组织和脂肪,正常
- Synonyms
- A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B
Documents
A9
Cell line · Product number 305166
A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...
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01General information
- Description
A9 细胞是一种纤维母细胞样细胞系,来源于小鼠脂肪组织。它们是 W. R. Earle 于 1940 年建立的 L929 母株的亚克隆。母株取自雄性 C3H/An 小鼠正常的皮下乳晕和脂肪组织。
这些细胞的一个显著特点是表达腺苷磷酸核糖转移酶(APRT)和次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT),分别称为 APRT+ 和 HPRT+。这些细胞在病毒研究中很有价值,特别是涉及伪狂犬病毒(PRV)、印第安纳株水泡性口炎病毒(VSV)和单纯疱疹病毒(HSV)的研究。
A9 细胞对这些病毒的敏感性和反应使它们成为研究病毒复制、发病机制和潜在抗病毒治疗的有用工具。在免疫学中,A9 细胞被用于多个研究领域。它们是研究免疫反应、抗体产生、单克隆抗体生成和杂交瘤技术的重要模型。
由于 A9 细胞增殖迅速(倍增时间约为 24 小时),因此可为实验和下游应用提供充足的细胞供应。A9 细胞具有类似成纤维细胞的形态,并粘附在培养基质上。A9 细胞被归类为动物细胞,属于杂交瘤细胞类型,是由小鼠的 B 淋巴细胞与同一物种的骨髓瘤细胞融合而成。
这种独特的组合使 A9 细胞同时具有 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性。总之,A9 细胞是一种成熟的成纤维细胞样细胞系,可用于研究病毒感染,尤其是 PRV、VSV 和 HSV,也可用于免疫学研究。
- Tissue
- 皮下结缔组织、松弛结缔组织和脂肪,正常
- Synonyms
- A-9
- A9 (Hamprecht)
- A9(Hamprecht)
- AG 9
- GM00346
- GM-346
- GM346
- GM00346B
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 纤维母细胞样
- Tumourigenic
- 是的,在裸鼠身上。
04Identifiers
- Citation
- A9(Cytion 产品编号 305166)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3984
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- H-2k
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Breed / subspecies
- C3H/An
- Donor age
- 100 天
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes