Skip to content
A9
Tissue
เนื้อเยื่อเกี่ยวพันใต้ผิวหนัง, เนื้อเยื่อเกี่ยวพันหลวม และไขมัน, ปกติ
Synonyms
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Documents

A9

Cell line · Product number 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ A9 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่มีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ซึ่งได้มาจากเนื้อเยื่อไขมันของหนู สายพันธุ์นี้ถูกสร้างขึ้นเป็นซับโคลนของสายพันธุ์ต้นกำเนิด L929 โดย W. R. Earle ในปี 1940 สายพันธุ์ต้นกำเนิดได้มาจากเนื้อเยื่อไขมันใต้ผิวหนังและเนื้อเยื่อไขมันปกติของหนูเพศผู้สายพันธุ์ C3H/An

ลักษณะเด่นของเซลล์เหล่านี้คือมีการแสดงออกของเอนไซม์อะดีโนซีนฟอสโฟไรโบซิลทรานสเฟอเรส (APRT) และไฮโปแซนธีนฟอสโฟไรโบซิลทรานสเฟอเรส (HPRT) ซึ่งระบุเป็น APRT+ และ HPRT+ ตามลำดับ เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าในการศึกษาไวรัส โดยเฉพาะอย่างยิ่งไวรัส pseudorabies (PRV) ไวรัส vesicular stomatitis (VSV) สายพันธุ์ Indiana และไวรัส herpes simplex(เอชเอสวี)

ความไวและการตอบสนองของเซลล์ A9 ต่อไวรัสเหล่านี้ทำให้เซลล์เหล่านี้มีประโยชน์ในการศึกษาการจำลองแบบของไวรัส, กระบวนการเกิดโรค, และการรักษาต้านไวรัสที่อาจเกิดขึ้นได้ ในด้านภูมิคุ้มกันวิทยา, เซลล์ A9 ถูกนำมาใช้ในหลากหลายสาขาการวิจัย พวกมันเป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน, การผลิตแอนติบอดี, การสร้างแอนติบอดีโมโนโคลนอล, และเทคโนโลยีไฮบริโดมา

เนื่องจากการเพิ่มจำนวนอย่างรวดเร็ว (มีระยะเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าประมาณ 24 ชั่วโมง) เซลล์ A9 จึงให้ปริมาณเซลล์ที่เพียงพอสำหรับการทดลองและการประยุกต์ใช้ในขั้นตอนต่อไป เซลล์ A9 มีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์และยึดเกาะกับพื้นผิวเพาะเลี้ยงได้ จัดอยู่ในประเภทเซลล์สัตว์และเป็นเซลล์ชนิดไฮบริโดมา เซลล์ A9 ถูกสร้างขึ้นโดยการหลอมรวมเซลล์บีลิมโฟไซต์จากหนู Mus musculus (หนูทดลอง) กับเซลล์ไมอีโลมาจากสายพันธุ์เดียวกัน

การผสมผสานที่เป็นเอกลักษณ์นี้ทำให้เซลล์ A9 แสดงคุณสมบัติของทั้งเซลล์ลิมโฟไซต์ B และเซลล์ไมอีโลมา โดยรวมแล้ว เซลล์ A9 เป็นสายพันธุ์เซลล์คล้ายไฟโบรบลาสต์ที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวาง ใช้ในการศึกษาการติดเชื้อไวรัส โดยเฉพาะ PRV, VSV และ HSV รวมถึงในด้านภูมิคุ้มกันวิทยา

Tissue
เนื้อเยื่อเกี่ยวพันใต้ผิวหนัง, เนื้อเยื่อเกี่ยวพันหลวม และไขมัน, ปกติ
Synonyms
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
A9 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305166)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_3984

05Expression and susceptibility

Antigen expression
เอช-2เค

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
ซี3เอช/แอน
Donor age
100 วัน