Gå direkt till innehållet
A9
Vävnad
Subkutan bindväv, lös bindväv och fett, normal
Synonymer
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

A9

Cell line · Produktnummer 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

A9-celler är en fibroblastliknande cellinje som härrör från fettvävnad från mus. De etablerades som en subklon av moderstammen L929 av W.R. Earle 1940. Föräldrastammen erhölls från normal subkutan areolär och fettvävnad från en C3H/An-hane.

En anmärkningsvärd egenskap hos dessa celler är att de uttrycker adenosinfosforibosyltransferas (APRT) och hypoxantinfosforibosyltransferas (HPRT), betecknade som APRT+ och HPRT+. Dessa celler har varit värdefulla i virusstudier, särskilt när det gäller pseudorabiesvirus (PRV), vesikulärt stomatitvirus (VSV) av Indiana-stammen och herpes simplex-virus (HSV).

A9-cellernas känslighet för och respons på dessa virus har gjort dem användbara för studier av virusreplikation, patogenes och potentiella antivirala behandlingar. Inom immunologin används A9-celler inom olika forskningsområden. De är en värdefull modell för att studera immunsvar, antikroppsproduktion, generering av monoklonala antikroppar och hybridomteknik.

Tack vare sin snabba proliferation (fördubblingstid på cirka 24 timmar) ger A9-celler en tillräcklig celltillgång för experiment och nedströmsapplikationer. A9-celler har en fibroblastliknande morfologi och fäster vid odlingssubstratet. A9-cellerna, som kategoriseras som djurceller och tillhör celltypen hybridom, bildades genom att B-lymfocyter från Mus musculus (mus) fusionerades med myelomceller från samma art.

Denna unika kombination gör att A9-cellerna uppvisar egenskaper hos både B-lymfocyter och myelomceller. Sammantaget är A9-celler en väletablerad fibroblastliknande cellinje som används för att studera virusinfektioner, särskilt PRV, VSV och HSV, och inom immunologi.

Vävnad
Subkutan bindväv, lös bindväv och fett, normal
Synonymer
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast-liknande
Tumörframkallande
Ja, i nakna möss.

04Identifierare

Källa
A9 (Cytion katalognummer 305166)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_3984

05Uttryck och mottaglighet

Antigenuttryck
H-2k

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
C3H/An
Donatorns ålder
100 dagar