الانتقال إلى المحتوى
A9
الأنسجة
النسيج الضام تحت الجلد، النسيج الضام الرخو والدهون، طبيعي
المرادفات
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

المستندات

A9

Cell line · رقم المنتج 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خلايا A9 هي سلالة خلايا تشبه الخلايا الليفية مشتقة من الأنسجة الدهنية للفأر. تم تأسيسها كسلالة فرعية من السلالة الأم L929 بواسطة دبليو آر إيرل في عام 1940. تم الحصول على السلالة الأم من الأنسجة الدهنية الطبيعية تحت الجلد والأنسجة الدهنية لذكر الفأر C3H/An.

ومن السمات البارزة في هذه الخلايا أنها تعبر عن الأدينوزين فوسفوريبوسيل ترانسفيراز (APRT) وفوسفوريبوسيل ترانسفيراز (HPRT)، ويُشار إليها باسم APRT+ وHPRT+. وقد كانت هذه الخلايا ذات قيمة في دراسات الفيروسات، لا سيما تلك المتعلقة بفيروس داء الكلب الكاذب (PRV)، وفيروس التهاب الفم الحويصلي (VSV) من سلالة إنديانا، وفيروس الهربس البسيط (HSV).

إن حساسية خلايا A9 واستجابتها لهذه الفيروسات جعلتها مفيدة في دراسة التكاثر الفيروسي والتسبب في الإصابة بالفيروسات والعلاجات المحتملة المضادة للفيروسات. في علم المناعة، تُستخدم خلايا A9 في مجالات بحثية مختلفة. فهي نموذج قيّم لدراسة الاستجابات المناعية، وإنتاج الأجسام المضادة، وتوليد الأجسام المضادة أحادية النسيلة، وتكنولوجيا الورم المهجن.

ونظرًا لتكاثرها السريع (مدة تضاعفها 24 ساعة تقريبًا)، توفر خلايا A9 إمدادات كافية من الخلايا للتجارب والتطبيقات النهائية. وتتميز خلايا A9 بمورفولوجيا تشبه الخلايا الليفية وتلتصق بركيزة الاستزراع. صُنّفت خلايا A9 على أنها خلايا حيوانية وتنتمي إلى نوع الخلايا المهجنة، وتم تكوين خلايا A9 عن طريق دمج الخلايا الليمفاوية البائية من الفأر العضلي (الفأر) مع خلايا الورم النخاعي من نفس النوع.

ويسمح هذا المزيج الفريد لخلايا A9 بإظهار خصائص كل من الخلايا الليمفاوية البائية وخلايا الورم النقوي. وبشكل عام، تُعد خلايا A9 خطًا خلويًا راسخًا شبيهًا بالخلايا الليفية يُستخدم لدراسة العدوى الفيروسية، وخاصةً فيروسات PRV وVSV وHSV، وفي علم المناعة.

الأنسجة
النسيج الضام تحت الجلد، النسيج الضام الرخو والدهون، طبيعي
المرادفات
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة الليفية الشبيهة بالأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية.

04المعرّفات

المرجع
A9 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305166)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_3984

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
هـ-2ك

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
ج 3 هـ/ع
عمر المتبرع
100 يوم