A9

Le cellule A9 sono una linea cellulare simil-fibroblastica derivata dal tessuto adiposo di topo. Sono state create come sottoclone del ceppo parentale L929 da W. R. Earle nel 1940. Il ceppo madre è stato ottenuto da tessuto areolare e adiposo sottocutaneo normale di un topo maschio C3H/An.

Una caratteristica notevole di queste cellule è che esprimono l'adenosina fosforibosil transferasi (APRT) e l'ipoxantina fosforibosil transferasi (HPRT), indicate come APRT+ e HPRT+. Queste cellule si sono rivelate preziose negli studi sui virus, in particolare per quanto riguarda il virus della pseudorabbia (PRV), il virus della stomatite vescicolare (VSV) del ceppo Indiana e il virus dell'herpes simplex (HSV).

La sensibilità e la risposta delle cellule A9 a questi virus le ha rese utili per studiare la replicazione virale, la patogenesi e i potenziali trattamenti antivirali. In immunologia, le cellule A9 sono utilizzate in diverse aree di ricerca. Sono un modello prezioso per studiare le risposte immunitarie, la produzione di anticorpi, la generazione di anticorpi monoclonali e la tecnologia degli ibridomi.

Grazie alla loro rapida proliferazione (tempo di raddoppio di circa 24 ore), le cellule A9 forniscono una riserva cellulare sufficiente per gli esperimenti e le applicazioni a valle. Le cellule A9 hanno una morfologia simile a quella dei fibroblasti e aderiscono al substrato di coltura. Classificate come cellule animali e appartenenti al tipo di cellule dell'ibridoma, le cellule A9 si sono formate fondendo linfociti B del Mus musculus (topo) con cellule di mieloma della stessa specie.

Questa combinazione unica permette alle cellule A9 di mostrare proprietà sia dei linfociti B che delle cellule di mieloma. Nel complesso, le cellule A9 sono una linea cellulare simil-fibroblastica ben consolidata, utilizzata per lo studio delle infezioni virali, in particolare PRV, VSV e HSV, e in immunologia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia