Ga naar de inhoud
A9
Weefsel
Onderhuids bindweefsel, los bindweefsel en vet, normaal
Synoniemen
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Documenten

A9

Cell line · Productnummer 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

A9 cellen zijn een fibroblast-achtige cellijn afkomstig van vetweefsel van muizen. Ze werden in 1940 door W. R. Earle gemaakt als een subkloon van de ouderstam L929. De ouderstam werd verkregen uit normaal onderhuids areolair en vetweefsel van een mannelijke C3H/An muis.

Een opvallend kenmerk van deze cellen is dat ze adenosine fosforibosyltransferase (APRT) en hypoxanthine fosforibosyltransferase (HPRT) tot expressie brengen, aangeduid als APRT+ en HPRT+. Deze cellen zijn waardevol geweest in virusstudies, vooral met pseudorabiësvirus (PRV), vesiculair stomatitisvirus (VSV) van de Indiana-stam en herpes simplexvirus (HSV).

De gevoeligheid en respons van A9-cellen op deze virussen maakt ze nuttig voor het bestuderen van virale replicatie, pathogenese en mogelijke antivirale behandelingen. In de immunologie worden A9 cellen gebruikt in verschillende onderzoeksgebieden. Ze zijn een waardevol model voor het bestuderen van immuunreacties, antilichaamproductie, het maken van monoklonale antilichamen en hybridoma-technologie.

Door hun snelle proliferatie (verdubbelingstijd van ongeveer 24 uur) leveren A9-cellen voldoende cellen voor experimenten en downstreamtoepassingen. A9 cellen hebben een fibroblast-achtige morfologie en hechten zich aan het kweeksubstraat. A9-cellen worden gecategoriseerd als dierlijke cellen en behoren tot het hybridoma celtype. Ze zijn gevormd door B-lymfocyten van Mus musculus (muis) te fuseren met myeloomcellen van dezelfde soort.

Door deze unieke combinatie vertonen A9-cellen eigenschappen van zowel B-lymfocyten als myeloomcellen. Over het algemeen zijn A9-cellen een gevestigde fibroblast-achtige cellijn die gebruikt wordt voor het bestuderen van virale infecties, vooral PRV, VSV en HSV, en in de immunologie.

Weefsel
Onderhuids bindweefsel, los bindweefsel en vet, normaal
Synoniemen
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
A9 (Cytion catalogusnummer 305166)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_3984

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
H-2k

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
C3H/An
Leeftijd van de donor
100 dagen