Skip to content
A9
Tissue
Mô liên kết dưới da, mô liên kết lỏng lẻo và mỡ, bình thường
Synonyms
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Documents

A9

Cell line · Product number 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào A9 là một dòng tế bào tương tự như tế bào sợi, được phân lập từ mô mỡ của chuột. Chúng được thiết lập như một dòng con của dòng tế bào gốc L929 bởi W. R. Earle vào năm 1940. Dòng tế bào gốc được thu được từ mô mỡ dưới da và mô mỡ của một con chuột đực C3H/An.

Một đặc điểm nổi bật của các tế bào này là chúng biểu hiện adenosine phosphoribosyl transferase (APRT) và hypoxanthine phosphoribosyl transferase (HPRT), được ký hiệu là APRT+ và HPRT+. Các tế bào này đã được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về virus, đặc biệt là virus pseudorabies (PRV), virus viêm miệng mụn nước (VSV) chủng Indiana và virus herpes simplex (HSV).

Độ nhạy và phản ứng của tế bào A9 đối với các virus này đã khiến chúng trở nên hữu ích trong việc nghiên cứu sự nhân lên của virus, cơ chế bệnh lý và các phương pháp điều trị kháng virus tiềm năng. Trong miễn dịch học, tế bào A9 được sử dụng trong nhiều lĩnh vực nghiên cứu. Chúng là mô hình quý giá để nghiên cứu phản ứng miễn dịch, sản xuất kháng thể, tạo kháng thể đơn dòng và công nghệ hybridoma.

Do khả năng nhân lên nhanh chóng (thời gian nhân đôi khoảng 24 giờ), tế bào A9 cung cấp nguồn tế bào đủ cho các thí nghiệm và ứng dụng tiếp theo. Tế bào A9 có hình thái tương tự tế bào sợi và bám dính vào nền nuôi cấy. Được phân loại là tế bào động vật và thuộc loại tế bào hybridoma, tế bào A9 được tạo ra bằng cách hợp nhất tế bào lympho B từ Mus musculus (chuột) với tế bào u tủy từ cùng loài.

Sự kết hợp độc đáo này cho phép tế bào A9 thể hiện các đặc tính của cả tế bào lympho B và tế bào u tủy. Nhìn chung, tế bào A9 là dòng tế bào giống tế bào sợi được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu nhiễm trùng virus, đặc biệt là PRV, VSV và HSV, cũng như trong miễn dịch học.

Tissue
Mô liên kết dưới da, mô liên kết lỏng lẻo và mỡ, bình thường
Synonyms
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast
Tumourigenic
Đúng vậy, trên chuột không lông.

04Identifiers

Citation
A9 (Mã sản phẩm Cytion 305166)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_3984

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2k

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C3H/An
Donor age
100 ngày