A9

As células A9 são uma linhagem celular semelhante aos fibroblastos, derivada do tecido adiposo de camundongo. Elas foram estabelecidas como um subclone da linhagem parental L929 por W. R. Earle em 1940. A linhagem parental foi obtida a partir de tecido areolar e adiposo subcutâneo normal de um camundongo C3H/An macho.

Uma característica notável dessas células é que elas expressam a adenosina fosforibosiltransferase (APRT) e a hipoxantina fosforibosiltransferase (HPRT), denominadas APRT+ e HPRT+. Essas células têm sido valiosas em estudos sobre vírus, particularmente aqueles envolvendo o vírus da pseudorrabia (PRV), o vírus da estomatite vesicular (VSV) da cepa Indiana e o vírus do herpes simplex (HSV).

A sensibilidade e a resposta das células A9 a esses vírus tornaram-nas úteis para o estudo da replicação viral, da patogênese e de possíveis tratamentos antivirais. Na imunologia, as células A9 são utilizadas em diversas áreas de pesquisa. Elas constituem um modelo valioso para o estudo de respostas imunológicas, produção de anticorpos, geração de anticorpos monoclonais e tecnologia de hibridomas.

Devido à sua rápida proliferação (tempo de duplicação de aproximadamente 24 horas), as células A9 fornecem um suprimento celular suficiente para experimentos e aplicações subsequentes. As células A9 apresentam morfologia semelhante à dos fibroblastos e aderem ao substrato de cultura. Classificadas como células animais e pertencentes ao tipo de célula de hibridoma, as células A9 foram formadas pela fusão de linfócitos B de Mus musculus (camundongo) com células de mieloma da mesma espécie.

Essa combinação única permite que as células A9 apresentem propriedades tanto dos linfócitos B quanto das células de mieloma. De modo geral, as células A9 são uma linhagem celular semelhante a fibroblastos bem estabelecida, utilizada para o estudo de infecções virais, especialmente PRV, VSV e HSV, e na imunologia.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.