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A9
ティッシュ
皮下結合組織、ゆるい結合組織および脂肪、正常
同義語
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

A9

Cell line · 製品番号 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

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01概要

説明

A9細胞はマウスの脂肪組織由来の線維芽細胞様細胞株である。1940年にW. R. EarleによりL929親株のサブクローンとして樹立された。親株は雄性C3H/Anマウスの正常な皮下乳胞および脂肪組織から得られた。

これらの細胞の特筆すべき特徴は、アデノシンホスホリボシルトランスフェラーゼ(APRT)とヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ(HPRT)を発現していることであり、APRT+およびHPRT+と表記される。これらの細胞は、特に仮性狂犬病ウイルス(PRV)、インディアナ株水疱性口内炎ウイルス(VSV)、単純ヘルペスウイルス(HSV)を含むウイルス研究において貴重な存在である。

これらのウイルスに対するA9細胞の感受性と応答性は、ウイルスの複製、病原性、潜在的な抗ウイルス治療の研究に有用である。免疫学では、A9細胞は様々な研究分野で用いられている。免疫応答、抗体産生、モノクローナル抗体作製、ハイブリドーマ技術を研究するための貴重なモデルである。

A9細胞は増殖が速いため(倍加時間は約24時間)、実験や下流の用途に十分な細胞供給が可能である。A9細胞は繊維芽細胞様の形態を持ち、培養基材に接着する。動物細胞として分類され、ハイブリドーマ細胞タイプに属するA9細胞は、Musculus(マウス)由来のBリンパ球と同種の骨髄腫細胞を融合することによって形成された。

このユニークな組み合わせにより、A9細胞はBリンパ球と骨髄腫細胞の両方の性質を示すことができる。全体として、A9細胞は、ウイルス感染、特にPRV、VSV、HSVの研究や免疫学に利用される、よく確立された線維芽細胞様細胞株である。

ティッシュ
皮下結合組織、ゆるい結合組織および脂肪、正常
同義語
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで。

04識別子

引用
A9(Cytion カタログ番号 305166)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_3984

05発現と感受性

抗原発現
H-2k

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
C3H/An
ドナーの年齢
100日