Μετάβαση στο περιεχόμενο
A9
Ιστός
Υποδόριος συνδετικός ιστός, χαλαρός συνδετικός ιστός και λίπος, φυσιολογικός
Συνώνυμα
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Έγγραφα

A9

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα Α9 είναι μια σειρά κυττάρων που μοιάζουν με ινοβλάστες και προέρχονται από λιπώδη ιστό ποντικού. Δημιουργήθηκαν ως υποκλώνος του γονικού στελέχους L929 από τον W. R. Earle το 1940. Το μητρικό στέλεχος ελήφθη από φυσιολογικό υποδόριο ιστικό ιστό και λιπώδη ιστό αρσενικού ποντικού C3H/An.

Ένα αξιοσημείωτο χαρακτηριστικό αυτών των κυττάρων είναι ότι εκφράζουν τη φωσφοριβοζυλοτρανσφεράση της αδενοσίνης (APRT) και τη φωσφοριβοζυλοτρανσφεράση της υποξανθίνης (HPRT), που συμβολίζονται ως APRT+ και HPRT+. Τα κύτταρα αυτά έχουν αποδειχθεί πολύτιμα σε μελέτες ιώσεων, ιδίως όσον αφορά τον ιό της ψευδοπανώλης (PRV), τον ιό της φυσαλιδώδους στοματίτιδας (VSV) του στελέχους Indiana και τον ιό του απλού έρπητα (HSV).

Η ευαισθησία και η ανταπόκριση των κυττάρων Α9 σε αυτούς τους ιούς τα έχουν καταστήσει χρήσιμα για τη μελέτη του πολλαπλασιασμού των ιών, της παθογένειας και των πιθανών αντι-ιικών θεραπειών. Στην ανοσολογία, τα κύτταρα Α9 χρησιμοποιούνται σε διάφορους ερευνητικούς τομείς. Αποτελούν ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη των ανοσολογικών αποκρίσεων, της παραγωγής αντισωμάτων, της παραγωγής μονοκλωνικών αντισωμάτων και της τεχνολογίας υβριδωμάτων.

Λόγω του γρήγορου πολλαπλασιασμού τους (χρόνος διπλασιασμού περίπου 24 ώρες), τα κύτταρα Α9 παρέχουν επαρκή προμήθεια κυττάρων για πειράματα και μεταγενέστερες εφαρμογές. Τα κύτταρα Α9 έχουν μορφολογία που μοιάζει με ινοβλάστες και προσκολλώνται στο υπόστρωμα καλλιέργειας. Τα κύτταρα Α9, τα οποία κατηγοριοποιούνται ως ζωικά κύτταρα και ανήκουν στον τύπο κυττάρων υβριδώματος, σχηματίστηκαν από τη σύντηξη λεμφοκυττάρων Β από Mus musculus (ποντίκι) με κύτταρα μυελώματος από το ίδιο είδος.

Αυτός ο μοναδικός συνδυασμός επιτρέπει στα κύτταρα Α9 να παρουσιάζουν ιδιότητες τόσο των λεμφοκυττάρων Β όσο και των κυττάρων μυελώματος. Συνολικά, τα κύτταρα Α9 είναι μια καθιερωμένη σειρά κυττάρων που μοιάζουν με ινοβλάστες και χρησιμοποιούνται για τη μελέτη ιογενών λοιμώξεων, ιδίως των PRV, VSV και HSV, και στην ανοσολογία.

Ιστός
Υποδόριος συνδετικός ιστός, χαλαρός συνδετικός ιστός και λίπος, φυσιολογικός
Συνώνυμα
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες που μοιάζουν με ινοβλάστες
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια.

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
A9 (αριθμός καταλόγου Cytion 305166)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_3984

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
H-2k

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C3H/An
Ηλικία δωρητή
100 ημέρες