תאי HMC3

קו התאים Human Microglial Clone 3 (HMC3) פותח בשנת 1995 על ידי צוותו של פרופ' Tardieu באמצעות הנצחת תאי מיקרוגליה מתאי חוט השדרה והקליפת המוח האנושיים, שהושגו מעוברים בגילאי 8 עד 12 שבועות, באמצעות SV40. תאים ראשוניים אלה, המאופיינים בחלוקה איטית ובמורפולוגיה מורכבת, הודגרו בתחילה במשך 10-15 ימים לפני ההנצחה. תאי HMC3 שמרו על מספר מאפיינים מרכזיים של מיקרוגליה ראשונית, כגון ביטוי מגוון של סמנים מיאלואידים כמו CD68, CD11b ו-CD14, אם כי רמות הביטוי השתנו באופן ניכר בהתאם לבחירת הנוגדן הראשוני, במיוחד עבור CD68.

לאחר ההנצחה, תאי HMC3 הפגינו שיעורי התרבות משופרים, עם זמן הכפלה בין 24 ל-48 שעות, תוך שמירה על מאפיינים פנוטיפיים ומורפולוגיים רבים של מקביליהם הראשוניים. ראוי לציין כי היה שיעור גבוה יותר של תאים חיוביים ל-CD68 EBM/11 וירידה בפעילות הפגוציטית בהשוואה לתאים הראשוניים. היציבות בביטוי האנטיגני אושרה ב-35 מעברים, כאשר התאים נותרו חיוביים ל-NSE, CD68 ו-CD11b, אך שליליים ל-CD14, MHCII ו-CD4 בתנאי בסיס. עם זאת, חשיפה לאינטרפרון-γ (IFNγ) העלתה את הביטוי של MHCII, והתאימה יותר לתגובות התרבית הראשונית לאותו טיפול.

מבחינה תפקודית, קו HMC3 הבדיל את עצמו על ידי ייצור רמות גבוהות יותר של אינטרלוקין-6 (IL-6) בתנאי בסיס בהשוואה לשכפולים אחרים. למרות זאת, השוואה ישירה עם ייצור ציטוקינים של תאי מיקרוגליה ראשוניים נותרת מאתגרת בשל הבדלים מתודולוגיים. התגובה לגירוי ליפופוליסכריד (LPS) בקווים המונצחים הללו נראתה מופחתת ביחס לתרבויות הראשוניות. בהתאם למאפיינים של מיקרוגליה ראשונית, קו HMC3 וקווים משובטים אחרים לא ייצרו גורם נמק הגידול אלפא (TNFα), לא באופן ספונטני ולא לאחר גירוי פרו-דלקתי, מה שמדגיש תכונה ספציפית של מיקרוגליה עוברי אנושי.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו