خلايا HMC3

تم تطوير سلالة الخلايا الدبقية الدبقية الدقيقة البشرية 3 (HMC3) في عام 1995 من قبل فريق البروفيسور تارديو من خلال تخليد الخلايا الدبقية الدقيقة البشرية المعتمدة على SV40 من أنسجة النخاع الشوكي البشري والأنسجة القشرية المأخوذة من أجنة تتراوح أعمارها بين 8 إلى 12 أسبوعاً. وقد تمت زراعة هذه الخلايا الأولية، التي تتميز بانقسامها البطيء وأشكالها المعقدة، في البداية لمدة 10-15 يوماً قبل تخليدها. احتفظت خلايا HMC3 بالعديد من السمات الرئيسية للخلايا الدبقية الصغيرة الأولية، مثل التعبير المتنوع للعلامات النخاعية مثل CD68 وCD11b وCD14، على الرغم من أن مستويات التعبير تختلف بشكل ملحوظ مع اختيار الجسم المضاد الأولي، خاصةً بالنسبة ل CD68.

بعد الخلود، أظهرت خلايا HMC3 معدلات تكاثر معززة، مع مضاعفة زمن التكاثر بين 24 و48 ساعة، مع الحفاظ على العديد من الخصائص المظهرية والمورفولوجية لنظيراتها الأولية. والجدير بالذكر أنه كان هناك نسبة أعلى من الخلايا الإيجابية CD68 EBM/11 وانخفاض في النشاط البلعمي مقارنةً بالخلايا الأولية. تم تأكيد الثبات في التعبير المستضدي عبر 35 ممرًا، مع بقاء الخلايا إيجابية لـ NSE وCD68 وCD11b، ولكنها سلبية لـ CD14 وMHCII وCD4 في ظل الظروف الأساسية. ومع ذلك، فقد أدى التعرض للإنترفيرون γ (IFNγ) إلى ارتفاع تعبير MHCII، مما يتماشى بشكل أكبر مع استجابات المستنبتات الأولية لنفس العلاج.

ومن الناحية الوظيفية، تميز خط HMC3 بإنتاج مستويات أعلى من الإنترلوكين-6 (IL-6) في الظروف القاعدية مقارنةً بالمستنسخات الأخرى. وعلى الرغم من ذلك، لا تزال المقارنة المباشرة مع إنتاج الخلايا الدبقية المجهرية الأولية للسيتوكين صعبة بسبب الاختلافات المنهجية. بدت الاستجابة لتحفيز عديدات السكاريد الشحمية (LPS) في هذه السلالات غير الخالدة أقل مقارنةً بالمزارع الأولية. واتساقًا مع خصائص الخلايا الدبقية الدبقية المجهرية الأولية، لم تنتج خلايا HMC3 وغيرها من السلالات المستنسخة عامل نخر الورم ألفا (TNFα)، سواء بشكل تلقائي أو بعد التحفيز المؤيد للالتهابات، مما يسلط الضوء على سمة محددة للخلايا الدبقية المجهرية الجنينية البشرية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان