ImWilms10T

קו התאים imWilms10T הוא גרסה מונצחת של קו התאים של הגידול הראשוני Wilms10T, אשר נגזר מדגימה של גידול וילמס (נפרובלסטומה) בחולה ילדים. קו תאים זה נבדל על ידי מחיקה הומוזיגוטית של הגן WT1, מה שמביא לאובדן מוחלט של תפקוד חלבון WT1. WT1 הוא גן חיוני להתפתחות הכליות, והמחיקה שלו ב-imWilms10T משקפת הפרעה גנטית חמורה הקשורה לפתוגנזה של גידול וילמס. בנוסף למחיקת WT1, תאי imWilms10T מציגים אובדן הטרוזיגוטיות (LOH) באזור הכרומוזום 11p15, הכולל גנים מרכזיים כגון IGF2, התורמים להתנהגות האגרסיבית של הגידול.

כדי להתגבר על תוחלת החיים המוגבלת של תאי Wilms10T, שושלת התאים imWilms10T הוקמה על ידי החדרת אנטיגן T גדול SV40 משולש מוטציה (U19dl89-97tsA58) לתאי הגידול המקוריים. תהליך ההנצחה הזה מאפשר לתאי imWilms10T להתרבות ללא הגבלה תוך שמירה על יציבות כרומוזומלית, ובכך מספק מודל אמין למחקרים ארוכי טווח. תאי imWilms10T שומרים על המאפיינים הקריטיים של קו Wilms10T ההורי, כולל אובדן מוחלט של WT1 ונוכחות LOH ב-11p15, מה שהופך אותם למשאב יקר ערך לחקר ההשלכות המולקולריות של מחיקת WT1 והתהליכים הסרטניים הנלווים.

תאי imWilms10T נחקרו בהרחבה בשל מעורבותם במסלולי איתות מרכזיים המניעים את התקדמות הגידול. ניתוחים פרוטאומיים גילו שתאים אלה מפגינים זרחון והפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כגון IGF1R, PDGFRβ ו-AXL. קולטנים מופעלים אלה מעבירים אותות דרך מסלולים במורד הזרם, כולל מסלולי MAPK ו-PI3K/AKT, החיוניים לשמירה על הפנוטיפ הממאיר של התאים. קו התאים imWilms10T משמש ככלי חשוב לחקר ההשפעה של אובדן WT1 מוחלט על איתות תאי, צמיחת גידולים ויעדים טיפוליים פוטנציאליים בגידול וילמס, במיוחד עבור תת-סוגים אגרסיביים יותר של הגידול.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו