ImWilms10T

La línea celular imWilms10T es una variante inmortalizada de la línea celular de tumor primario Wilms10T, derivada de una muestra de tumor de Wilms (nefroblastoma) de un paciente pediátrico. Esta línea celular se distingue por una deleción homocigota del gen WT1, que provoca una pérdida completa de la función de la proteína WT1. WT1 es un gen crucial para el desarrollo renal, y su deleción en imWilms10T refleja una alteración genética grave que está asociada a la patogénesis del tumor de Wilms. Además de la deleción de WT1, las células imWilms10T presentan pérdida de heterocigosidad (LOH) en la región cromosómica 11p15, que incluye genes clave como IGF2, lo que contribuye al comportamiento agresivo del tumor.

Para superar la limitada vida útil de las células Wilms10T, se estableció la línea celular imWilms10T introduciendo un antígeno SV40 gran T triple mutante (U19dl89-97tsA58) en las células tumorales originales. Este proceso de inmortalización permite a las células imWilms10T proliferar indefinidamente manteniendo la estabilidad cromosómica, lo que proporciona un modelo fiable para estudios a largo plazo. Las células imWilms10T conservan las características críticas de la línea Wilms10T parental, incluyendo la pérdida completa de WT1 y la presencia de LOH en 11p15, lo que las convierte en un recurso inestimable para estudiar las consecuencias moleculares de la deleción de WT1 y los procesos tumorigénicos asociados.

las células imWilms10T han sido ampliamente estudiadas por su implicación en vías de señalización clave que impulsan la progresión tumoral. Los análisis proteómicos han revelado que estas células presentan fosforilación y activación de varios receptores tirosina quinasa (RTK), como IGF1R, PDGFRβ y AXL. Estos receptores activados señalizan a través de vías descendentes, incluidas las vías MAPK y PI3K/AKT, que son cruciales para mantener el fenotipo maligno de las células. La línea celular imWilms10T es una herramienta importante para investigar el impacto de la pérdida completa de WT1 en la señalización celular, el crecimiento tumoral y las posibles dianas terapéuticas en el tumor de Wilms, especialmente en los subtipos tumorales más agresivos.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía