ImWilms10T

"imWilms10T" ląstelių linija yra imortalizuotas pirminės Wilms10T naviko ląstelių linijos variantas, gautas iš Wilms naviko (nefroblastomos) mėginio, paimto iš pediatrinio paciento. Ši ląstelių linija išsiskiria homozigotine WT1 geno delecija, dėl kurios visiškai prarandama WT1 baltymo funkcija. WT1 yra labai svarbus genas inkstų vystymuisi, o jo ištrynimas imWilms10T linijoje atspindi sunkų genetinį sutrikimą, susijusį su Vilmso naviko patogeneze. Be WT1 delecijos, imWilms10T ląstelėms būdingas heterozigotiškumo praradimas (LOH) 11p15 chromosomų srityje, kurioje yra svarbiausi genai, pavyzdžiui, IGF2, o tai lemia agresyvią naviko elgseną.

Siekiant įveikti ribotą Wilms10T ląstelių gyvavimo trukmę, imWilms10T ląstelių linija buvo sukurta į originalias naviko ląsteles įvedus trigubai mutavusį SV40 didelį T antigeną (U19dl89-97tsA58). Šis imortalizacijos procesas leidžia imWilms10T ląstelėms daugintis neribotą laiką, išlaikant chromosomų stabilumą, todėl jos tampa patikimu ilgalaikių tyrimų modeliu. ImWilms10T ląstelės išlaiko svarbiausias tėvinės Wilms10T linijos savybes, įskaitant visišką WT1 praradimą ir LOH 11p15 vietoje, todėl jos yra neįkainojamas šaltinis tiriant molekulines WT1 pašalinimo pasekmes ir su tuo susijusius navikinius procesus.

imWilms10T ląstelės buvo išsamiai tiriamos dėl jų dalyvavimo pagrindiniuose signaliniuose keliuose, skatinančiuose naviko progresavimą. Proteominės analizės atskleidė, kad šiose ląstelėse fosforilinama ir aktyvuojama keletas receptorių tirozino kinazių (RTK), tokių kaip IGF1R, PDGFRβ ir AXL. Šie aktyvuoti receptoriai siunčia signalus per tolesnius kelius, įskaitant MAPK ir PI3K/AKT kelius, kurie yra labai svarbūs piktybiniam ląstelių fenotipui palaikyti. Ląstelių linija imWilms10T yra svarbus įrankis tiriant visiško WT1 praradimo įtaką ląstelių signalizacijai, naviko augimui ir galimiems Vilmso naviko, ypač agresyvesnių naviko potipių, terapiniams taikiniams.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime