ImWilms10T

Клітинна лінія imWilms10T - це іморталізований варіант лінії клітин первинної пухлини Wilms10T, яка була отримана зі зразка пухлини Вільмса (нефробластоми) у педіатричного пацієнта. Ця клітинна лінія відрізняється гомозиготною делецією гена WT1, що призводить до повної втрати функції білка WT1. WT1 є критично важливим геном для розвитку нирок, і його делеція в imWilms10T відображає важке генетичне порушення, яке пов'язане з патогенезом пухлини Вільмса. На додаток до делеції WT1, клітини imWilms10T демонструють втрату гетерозиготності (LOH) у хромосомній ділянці 11p15, яка включає ключові гени, такі як IGF2, що сприяє агресивній поведінці пухлини.

Щоб подолати обмежену тривалість життя клітин Wilms10T, була створена клітинна лінія imWilms10T шляхом введення потрійного мутантного великого Т-антигену SV40 (U19dl89-97tsA58) у вихідні пухлинні клітини. Цей процес імморталізації дозволяє клітинам imWilms10T проліферувати нескінченно довго, зберігаючи хромосомну стабільність, забезпечуючи тим самим надійну модель для довгострокових досліджень. Клітини imWilms10T зберігають критичні характеристики батьківської лінії Wilms10T, включаючи повну втрату WT1 і наявність LOH в 11p15, що робить їх безцінним ресурсом для вивчення молекулярних наслідків делеції WT1 і пов'язаних з нею пухлинних процесів.

клітини imWilms10T інтенсивно вивчаються на предмет їх участі в ключових сигнальних шляхах, що визначають пухлинну прогресію. Протеомний аналіз показав, що в цих клітинах відбувається фосфорилювання та активація декількох рецепторних тирозинкіназ (RTK), таких як IGF1R, PDGFRβ та AXL. Ці активовані рецептори передають сигнали через наступні шляхи, включаючи MAPK і PI3K/AKT, які мають вирішальне значення для підтримки злоякісного фенотипу клітин. Клітинна лінія imWilms10T слугує важливим інструментом для дослідження впливу повної втрати WT1 на клітинну сигналізацію, ріст пухлини та потенційні терапевтичні мішені при пухлині Вільмса, особливо для більш агресивних підтипів пухлин.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>