ImWilms10T

ImWilms10T rakuliin on Wilms10T primaarse tuumori rakuliini immortaliseeritud variant, mis on saadud Wilmsi kasvaja (nefroblastoomi) proovist lastel. Seda rakuliini eristab WT1 geeni homosügootne deletsioon, mille tulemuseks on WT1 valgu funktsiooni täielik kadumine. WT1 on neerude arengu jaoks oluline geen ja selle deletsioon imWilms10T-s peegeldab tõsist geneetilist häiret, mis on seotud Wilmsi kasvaja patogeneesiga. Lisaks WT1 deletsioonile esineb imWilms10T rakkudes heterosügootsuse kadu (LOH) kromosoomi 11p15 piirkonnas, mis hõlmab selliseid olulisi geene nagu IGF2, mis aitavad kaasa kasvaja agressiivsele käitumisele.

Wilms10T rakkude piiratud eluea ületamiseks loodi imWilms10T rakuliin, viies algsetesse kasvajarakkudesse sisse kolmekordse mutantse SV40 suure T antigeeni (U19dl89-97tsA58). See immortaliseerimisprotsess võimaldab imWilms10T rakkudel lõputult paljuneda, säilitades samal ajal kromosoomide stabiilsuse, pakkudes seega usaldusväärset mudelit pikaajalisteks uuringuteks. ImWilms10T rakud säilitavad vanemliku Wilms10T liini kriitilised omadused, sealhulgas WT1 täieliku kadumise ja LOH esinemise 11p15 juures, mis teeb neist hindamatu ressursi WT1 deletsiooni molekulaarsete tagajärgede ja sellega seotud kasvajaliste protsesside uurimiseks.

imWilms10T rakke on põhjalikult uuritud nende osalemise suhtes peamistes signaaliradades, mis juhivad kasvaja progresseerumist. Proteoomilised analüüsid on näidanud, et neis rakkudes on fosforüleeritud ja aktiveeritud mitmed retseptori türosiini kinaasid (RTK), nagu IGF1R, PDGFRβ ja AXL. Need aktiveeritud retseptorid annavad signaali allavoolu radade kaudu, sealhulgas MAPK ja PI3K/AKT radade kaudu, mis on olulised rakkude pahaloomulise fenotüübi säilitamiseks. ImWilms10T rakuliin on oluline vahend, et uurida WT1 täieliku kadumise mõju rakkude signaalimisele, kasvaja kasvule ja potentsiaalsetele terapeutilistele sihtmärkidele Wilmsi kasvaja puhul, eriti agressiivsemate kasvajate alatüüpide puhul.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest