ImWilms10T

imWilms10T細胞株は、小児患者のウィルムス腫瘍（腎芽腫）サンプルに由来するウィルムス10T原発腫瘍細胞株の不死化変異体である。この細胞株は、WT1遺伝子のホモ接合性欠失により、WT1タンパク質の機能が完全に失われていることで区別される。WT1は腎臓の発生に重要な遺伝子であり、imWilms10Tにおけるその欠失は、ウィルムス腫瘍の病態に関連する重篤な遺伝子破壊を反映している。WT1の欠失に加え、imWilms10T細胞は、IGF2などの重要遺伝子を含む11p15染色体領域でヘテロ接合性の欠損（LOH）を示し、腫瘍の攻撃的な挙動に寄与している。

Wilms10T細胞の寿命の制限を克服するために、三重変異SV40ラージT抗原（U19dl89-97tsA58）を元の腫瘍細胞に導入することにより、imWilms10T細胞株が樹立された。この不死化プロセスにより、imWilms10T細胞は染色体の安定性を維持したまま無期限に増殖することが可能となり、長期的研究のための信頼できるモデルとなった。imWilms10T細胞は、WT1の完全欠損や11p15におけるLOHの存在など、親Wilms10T系統の重要な特徴を保持しており、WT1欠失の分子的結果や関連する腫瘍形成過程を研究するための貴重なリソースとなっている。

imWilms10T細胞は、腫瘍の進行を促進する主要なシグナル伝達経路への関与について広く研究されてきた。プロテオーム解析により、これらの細胞はIGF1R、PDGFRβ、AXLなどのいくつかの受容体チロシンキナーゼ（RTK）のリン酸化と活性化を示すことが明らかになった。これらの活性化されたレセプターは、MAPK経路やPI3K/ACT経路などの下流経路を介してシグナルを伝達し、細胞の悪性表現型の維持に重要な役割を果たしている。imWilms10T細胞株は、WT1の完全欠損がウィルムス腫瘍の細胞シグナル伝達、腫瘍増殖、潜在的治療標的、特により攻撃的な腫瘍サブタイプに及ぼす影響を調べるための重要なツールである。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。