ImWilms10T

ImWilms10T-solulinja on kuolematon muunnos Wilms10T-primaarisesta kasvainsolulinjasta, joka on peräisin lapsipotilaan Wilms-kasvaimesta (nefroblastoomasta) otetusta näytteestä. Tämän solulinjan erottaa WT1-geenin homotsygoottinen deleetio, joka johtaa WT1-proteiinin toiminnan täydelliseen katoamiseen. WT1 on ratkaisevan tärkeä geeni munuaisten kehitykselle, ja sen deletoituminen imWilms10T:ssä kuvastaa vakavaa geneettistä häiriötä, joka liittyy Wilmsin kasvaimen patogeneesiin. WT1-deleetion lisäksi imWilms10T-soluissa esiintyy heterotsygotian menetystä (LOH) kromosomialueella 11p15, johon kuuluu keskeisiä geenejä, kuten IGF2, mikä vaikuttaa osaltaan kasvaimen aggressiiviseen käyttäytymiseen.

Wilms10T-solujen rajallisen eliniän voittamiseksi imWilms10T-solulinja perustettiin tuomalla alkuperäisiin kasvainsoluihin kolminkertainen mutaatio SV40 large T -antigeeni (U19dl89-97tsA58). Tämän kuolemattomuusprosessin ansiosta imWilms10T-solut voivat lisääntyä loputtomiin säilyttäen samalla kromosomistabiilisuuden, mikä tarjoaa luotettavan mallin pitkäaikaisia tutkimuksia varten. ImWilms10T-solut säilyttävät vanhempien Wilms10T-linjan kriittiset ominaisuudet, mukaan lukien WT1:n täydellinen menetys ja LOH:n esiintyminen 11p15:ssä, mikä tekee niistä korvaamattoman arvokkaan resurssin WT1-deleetion molekulaaristen seurausten ja siihen liittyvien kasvainten syntyprosessien tutkimiseen.

imWilms10T-soluja on tutkittu laajasti niiden osallistumisen vuoksi keskeisiin signaalireitteihin, jotka ohjaavat kasvainten etenemistä. Proteomianalyysit ovat paljastaneet, että näissä soluissa esiintyy useiden reseptorityrosiinikinaasien (RTK), kuten IGF1R:n, PDGFRβ:n ja AXL:n, fosforylaatiota ja aktivoitumista. Nämä aktivoituneet reseptorit välittävät signaalia alempien polkujen kautta, mukaan lukien MAPK- ja PI3K/AKT-reitit, jotka ovat ratkaisevia solujen pahanlaatuisen fenotyypin ylläpitämiseksi. ImWilms10T-solulinja toimii tärkeänä välineenä tutkittaessa täydellisen WT1-kadon vaikutusta solujen signalointiin, kasvaimen kasvuun ja mahdollisiin terapeuttisiin kohteisiin Wilmsin kasvaimessa, erityisesti aggressiivisimmissa kasvainten alatyypeissä.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa