ImWilms10T

Клетъчната линия imWilms10T е имортализиран вариант на първичната туморна клетъчна линия Wilms10T, която е получена от проба от тумор на Wilms (нефробластом) на педиатричен пациент. Тази клетъчна линия се отличава с хомозиготна делеция на гена WT1, което води до пълна загуба на функцията на протеина WT1. WT1 е ключов ген за развитието на бъбреците и неговата делеция в imWilms10T отразява тежко генетично нарушение, което се свързва с патогенезата на тумора на Wilms. В допълнение към делецията на WT1, клетките imWilms10T показват загуба на хетерозиготност (LOH) в хромозомната област 11p15, която включва ключови гени като IGF2, допринасящи за агресивното поведение на тумора.

За да се преодолее ограничената продължителност на живота на клетките Wilms10T, е създадена клетъчната линия imWilms10T чрез въвеждане на тройно мутирал голям Т антиген на SV40 (U19dl89-97tsA58) в оригиналните туморни клетки. Този процес на имортализация позволява на клетките imWilms10T да се размножават неограничено, като същевременно запазват хромозомната си стабилност, като по този начин осигуряват надежден модел за дългосрочни изследвания. Клетките imWilms10T запазват критичните характеристики на родителската линия Wilms10T, включително пълната загуба на WT1 и наличието на LOH в 11p15, което ги прави безценен ресурс за изучаване на молекулярните последици от делецията на WT1 и свързаните с нея туморогенни процеси.

клетките imWilms10T са подробно проучени за участието им в ключови сигнални пътища, които стимулират туморната прогресия. Протеомичните анализи разкриха, че тези клетки показват фосфорилиране и активиране на няколко рецепторни тирозинкинази (RTK), като IGF1R, PDGFRβ и AXL. Тези активирани рецептори подават сигнали по пътища надолу по веригата, включително по пътищата MAPK и PI3K/AKT, които са от решаващо значение за поддържане на злокачествения фенотип на клетките. Клетъчната линия imWilms10T служи като важен инструмент за изследване на влиянието на пълната загуба на WT1 върху клетъчната сигнализация, туморния растеж и потенциалните терапевтични цели при тумора на Вилмс, особено при по-агресивните подтипове на тумора.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация