ImWilms10T

ImWilms10T hücre hattı, bir pediatrik hastadaki Wilms tümörü (nefroblastom) örneğinden türetilen Wilms10T primer tümör hücre hattının ölümsüzleştirilmiş bir varyantıdır. Bu hücre hattı, WT1 geninin homozigot delesyonu ile ayırt edilir ve WT1 protein fonksiyonunun tamamen kaybına neden olur. WT1, böbrek gelişimi için çok önemli bir gendir ve imWilms10T'deki delesyonu, Wilms tümörünün patogeneziyle ilişkili ciddi bir genetik bozulmayı yansıtır. WT1 delesyonuna ek olarak, imWilms10T hücreleri, tümörün agresif davranışına katkıda bulunan IGF2 gibi anahtar genleri içeren 11p15 kromozomal bölgesinde heterozigotluk kaybı (LOH) sergiler.

Wilms10T hücrelerinin sınırlı ömrünün üstesinden gelmek için, orijinal tümör hücrelerine üçlü mutant SV40 büyük T antijeni (U19dl89-97tsA58) eklenerek imWilms10T hücre hattı oluşturulmuştur. Bu ölümsüzleştirme süreci, imWilms10T hücrelerinin kromozomal stabiliteyi korurken süresiz olarak çoğalmasını sağlar ve böylece uzun vadeli çalışmalar için güvenilir bir model sunar. ImWilms10T hücreleri, WT1'in tamamen kaybı ve 11p15'te LOH varlığı da dahil olmak üzere ebeveyn Wilms10T hattının kritik özelliklerini korumakta, bu da onları WT1 delesyonunun moleküler sonuçlarını ve ilişkili tümörijenik süreçleri incelemek için paha biçilmez bir kaynak haline getirmektedir.

imWilms10T hücreleri, tümör ilerlemesini yönlendiren temel sinyal yollarına katılımları açısından kapsamlı bir şekilde incelenmiştir. Proteomik analizler, bu hücrelerin IGF1R, PDGFRβ ve AXL gibi çeşitli reseptör tirozin kinazların (RTK'lar) fosforilasyonunu ve aktivasyonunu sergilediğini ortaya koymuştur. Bu aktive edilmiş reseptörler, hücrelerin malign fenotipini sürdürmek için çok önemli olan MAPK ve PI3K/AKT yolakları dahil olmak üzere aşağı akış yolakları üzerinden sinyal verir. ImWilms10T hücre hattı, Wilms tümöründe, özellikle daha agresif tümör alt tipleri için, tam WT1 kaybının hücresel sinyalizasyon, tümör büyümesi ve potansiyel terapötik hedefler üzerindeki etkisini araştırmak için önemli bir araç görevi görmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın