Skip to content
NE-4C
Tissue
מוח, נוירואקטודרמי

Documents

NE-4C

Cell line · Product number 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

תאי NE-4C הם קו תאי גזע נוירו-אקטודרמליים של עכבר, המופקים מהשלפוחיות המוחיות של רקמת מוח עוברית של עכבר. קו התאים מוכר באופן נרחב בזכות יכולתו לעבור התמיינות נוירונלית בתנאים ניסוייים מוגדרים, מה שהופך אותו למודל מעבדה חשוב למחקרים בתחום הנוירוגנזה, ההתפתחות העצבית והתחייבות לשושלת נוירונלית. תאי NE-4C מפגינים מאפיינים של תאי אב עצביים וניתן לגרום להם להתמיין לתאים דמויי נוירונים באמצעות טיפול בחומרים כגון חומצה רטינואית, מה שמביא לשינויים מורפולוגיים ומולקולריים הקשורים להתבגרות עצבית.

במהלך ההתמיינות, תאי NE-4C מפתחים שלוחות דמויות נויריטים ומבטאים סמנים עצביים, כולל βIII-tubulin, MAP2 וחלבוני נוירופילמנט, בהתאם לפרוטוקול ההתמיינות הננקט. בשל התנהגות ההתמיינות ההומוגנית יחסית שלהם ותגובתם הניתנת לשחזור לגירויים מושרים, תאי NE-4C משמשים בדרך כלל לחקר מסלולי איתות המעורבים בספציפיקציה עצבית, התפתחות סינפטית, נוירוטוקסיות, תגובות למתח חמצוני ומנגנוני הגנה עצבית. המודל יושם גם במחקרים על מנגנוני מחלות ניווניות של מערכת העצבים, נוירוביולוגיה התפתחותית, ובדיקת תרכובות המשפיעות על התמיינות או הישרדות נוירונים.

Tissue
מוח, נוירואקטודרמי

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
נוירו-אפיתליאלי

04Identifiers

Citation
NE-4C (מספר קטלוגי של Cytion: 305182)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Sox-2, Otx-2, En-1

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Donor age
עובר