NE-4C
Cell line · Product number 305182
NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...
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01General information
- Description
NE-4C细胞是一种源自小鼠胚胎脑组织脑泡的小鼠神经外胚层干细胞系。该细胞系因能在特定实验条件下发生神经元分化而广受认可,使其成为研究神经发生、神经发育及神经元谱系决定过程的宝贵体外模型。 NE-4C细胞表现出神经前体细胞的特征,可通过视黄酸等试剂的处理诱导其分化为神经元样细胞,从而产生与神经元成熟相关的形态学和分子变化。
在分化过程中,NE-4C细胞会伸出类似神经突的突起,并根据所采用的分化方案,表达包括βIII-微管蛋白、MAP2和神经丝蛋白在内的神经元标志物。 由于其分化行为相对均匀且对诱导刺激的反应可重复,NE-4C 细胞常被用于研究参与神经特化、突触发育、神经毒性、氧化应激反应以及神经保护机制的信号传导通路。 该模型还被应用于神经退行性疾病机制的研究、发育神经生物学以及影响神经元分化或存活的化合物的筛选。
- Tissue
- 大脑,神经外胚层
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 神经上皮
04Identifiers
- Citation
- NE-4C(Cytion 产品编号 305182)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_B063
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Sox-2、Otx-2、En-1
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1至3×10⁴个细胞/平方厘米
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6 × 129/Sv-Trp53-/-
- Donor age
- 胚胎
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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