Перейти до вмісту
NE-4C
Тканина
Мозок, нейроектодерма

Документи

NE-4C

Cell line · Номер товару 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини NE-4C — це лінія мишачих нейроектодермальних стовбурових клітин, отримана з церебральних везикул ембріональної тканини мозку миші. Ця клітинна лінія широко відома своєю здатністю до нейрональної диференціації в певних експериментальних умовах, що робить її цінною моделлю in vitro для досліджень нейрогенезу, нервового розвитку та визначення нейронального лінійного напрямку. Клітини NE-4C виявляють характеристики нейральних прогеніторних клітин і можуть бути індуковані до диференціації в нейроноподібні клітини шляхом обробки такими речовинами, як ретиноєва кислота, що призводить до морфологічних та молекулярних змін, пов’язаних із дозріванням нейронів.

Під час диференціації клітини NE-4C утворюють подовжені нейритоподібні відростки та експресують нейрональні маркери, зокрема βIII-тубулін, MAP2 та нейрофіламентні білки, залежно від застосованого протоколу диференціації. Завдяки відносно однорідній поведінці під час диференціації та відтворюваній реакції на індуктивні стимули клітини NE-4C широко використовуються для дослідження сигнальних шляхів, що беруть участь у нейральній специфікації, розвитку синапсів, нейротоксичності, реакціях на окислювальний стрес та нейропротекторних механізмах. Цю модель також застосовують у дослідженнях механізмів нейродегенеративних захворювань, нейробіології розвитку та скринінгу сполук, що впливають на диференціацію або виживання нейронів.

Тканина
Мозок, нейроектодерма

02Класифікація

Організм
Миша
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Нейроепітеліальний

04Ідентифікатори

Посилання
NE-4C (номер у каталозі Cytion — 305182)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_B063

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
Sox-2, Otx-2, En-1

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Від 1 до 3 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
C57BL/6 × 129/Sv-Trp53-/-
Вік донора
Ембріон