Gå direkte til indholdet
NE-4C
Væv
Hjerne, neuroektoderm

Dokumenter

NE-4C

Cell line · Varenummer 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NE-4C-celler er en murin neuroektodermal stamcellelinje, der stammer fra hjernevæskerne i embryonalt musehjernevæv. Cellelinjen er bredt anerkendt for sin evne til at gennemgå neuronal differentiering under definerede eksperimentelle betingelser, hvilket gør den til en værdifuld in vitro-model til undersøgelser af neurogenese, neural udvikling og neuronal linjedifferentiering. NE-4C-celler udviser karakteristika for neurale progenitorceller og kan induceres til at differentiere sig til neuronlignende celler gennem behandling med stoffer såsom retinsyre, hvilket resulterer i morfologiske og molekylære ændringer forbundet med neuronal modning.

Under differentieringen udvikler NE-4C-celler udstrakte neuritlignende udvækster og udtrykker neuronale markører, herunder βIII-tubulin, MAP2 og neurofilamentproteiner, afhængigt af den anvendte differentieringsprotokol. På grund af deres relativt homogene differentieringsadfærd og reproducerbare respons på inducerende stimuli anvendes NE-4C-celler ofte til at undersøge signalveje, der er involveret i neural specificering, synaptisk udvikling, neurotoksicitet, reaktioner på oxidativt stress og neurobeskyttende mekanismer. Modellen er også blevet anvendt i studier af mekanismerne bag neurodegenerative sygdomme, udviklingsneurobiologi og screening af forbindelser, der påvirker neuronal differentiering eller overlevelse.

Væv
Hjerne, neuroektoderm

02Klassificering

Organisme
Mus
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Neuroepitel

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NE-4C (Cytion-katalognummer 305182)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
Sox-2, Otx-2, En-1

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Donorens alder
Embryo