Skip to content
NE-4C
Tissue
สมอง, นิวโรเอกโตเดิร์ม

Documents

NE-4C

Cell line · Product number 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

เซลล์ NE-4C เป็นสายพันธุ์เซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อสมองของหนูที่แยกได้จากถุงสมองของตัวอ่อนหนู สายพันธุ์นี้ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางในด้านความสามารถในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ประสาทภายใต้สภาวะการทดลองที่กำหนดไว้ ทำให้เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการสร้างเซลล์ประสาทใหม่ การพัฒนาของระบบประสาท และการกำหนดเส้นทางของเซลล์ประสาท เซลล์ NE-4C แสดงลักษณะของเซลล์ต้นกำเนิดประสาทและสามารถถูกชักนำให้เปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์คล้ายเซลล์ประสาทได้ผ่านการรักษาด้วยสารต่างๆ เช่น กรดเรติโนอิก ซึ่งส่งผลให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาและโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตของเซลล์ประสาท

ในระหว่างการแยกตัว เซลล์ NE-4C จะพัฒนาเป็นกระบวนการคล้ายเส้นใยประสาทที่ยืดออกและแสดงเครื่องหมายของเซลล์ประสาทรวมถึง βIII-tubulin, MAP2 และโปรตีน neurofilament ขึ้นอยู่กับวิธีการแยกตัวที่ใช้ เนื่องจากพฤติกรรมการแยกตัวที่ค่อนข้างเหมือนกันและตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นแบบเหนี่ยวนำได้ซ้ำๆ เซลล์ NE-4C จึงมักถูกใช้ในการศึกษาเส้นทางสัญญาณที่เกี่ยวข้องกับการกำหนดลักษณะเฉพาะของเซลล์ประสาท การพัฒนาไซแนปส์ ความเป็นพิษต่อระบบประสาท การตอบสนองต่อความเครียดออกซิเดชัน และกลไกการปกป้องระบบประสาท แบบจำลองนี้ยังถูกนำไปประยุกต์ใช้ในงานวิจัยเกี่ยวกับกลไกของโรคทางระบบประสาทเสื่อม, ชีววิทยาพัฒนาการของระบบประสาท, และการคัดกรองสารประกอบที่มีผลต่อการแยกตัวหรือการอยู่รอดของเซลล์ประสาท

Tissue
สมอง, นิวโรเอกโตเดิร์ม

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
นิวโรเอพิธีเลียม

04Identifiers

Citation
NE-4C (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305182)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Sox-2, Otx-2, En-1

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 ถึง 3 x 104 เซลล์/เซนติเมตร²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Donor age
เอ็มบริโอ