Przejdź do treści
NE-4C
Chusteczka
Mózg, neuroektodermalny

Dokumenty

NE-4C

Cell line · Numer produktu 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki NE-4C to mysia linia komórek macierzystych neuroektodermalnych, pochodząca z pęcherzyków mózgowych embrionalnej tkanki mózgowej myszy. Linia ta jest powszechnie znana ze swojej zdolności do różnicowania się w komórki neuronalne w określonych warunkach eksperymentalnych, co czyni ją cennym modelem in vitro do badań nad neurogenezą, rozwojem układu nerwowego oraz determinacją linii komórkowej neuronów. Komórki NE-4C wykazują cechy komórek progenitorowych układu nerwowego i można je indukować do różnicowania się w komórki podobne do neuronów poprzez traktowanie środkami takimi jak kwas retinowy, co prowadzi do zmian morfologicznych i molekularnych związanych z dojrzewaniem neuronów.

W trakcie różnicowania komórki NE-4C wytwarzają wydłużone wypustki przypominające neuryty i wykazują ekspresję markerów neuronalnych, w tym βIII-tubuliny, MAP2 oraz białek neurofilamentowych, w zależności od zastosowanego protokołu różnicowania. Ze względu na stosunkowo jednorodne zachowanie podczas różnicowania oraz powtarzalną reakcję na bodźce indukujące komórki NE-4C są powszechnie wykorzystywane do badania szlaków sygnałowych związanych ze specyfikacją neuronów, rozwojem synaps, neurotoksycznością, reakcjami na stres oksydacyjny oraz mechanizmami neuroprotekcyjnymi. Model ten znalazł również zastosowanie w badaniach nad mechanizmami chorób neurodegeneracyjnych, neurobiologią rozwojową oraz w badaniach przesiewowych związków wpływających na różnicowanie lub przeżywalność neuronów.

Chusteczka
Mózg, neuroektodermalny

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Neuroepitelialny

04Identyfikatory

Źródło
NE-4C (numer katalogowy Cytion 305182)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Sox-2, Otx-2, En-1

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Wiek dawcy
Zarodek