Μετάβαση στο περιεχόμενο
NE-4C
Ιστός
Εγκέφαλος, Νευροεκτοδερμικός

Έγγραφα

NE-4C

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα NE-4C αποτελούν μια σειρά ποντικών νευροεκτοδερμικών βλαστικών κυττάρων που προέρχονται από τις εγκεφαλικές κύστεις εμβρυϊκού ιστού εγκεφάλου ποντικού. Η κυτταρική σειρά είναι ευρέως αναγνωρισμένη για την ικανότητά της να υφίσταται νευρωνική διαφοροποίηση υπό καθορισμένες πειραματικές συνθήκες, γεγονός που την καθιστά ένα πολύτιμο in vitro μοντέλο για μελέτες σχετικά με τη νευρογένεση, τη νευρική ανάπτυξη και την καθοδήγηση της νευρωνικής γενεαλογικής σειράς. Τα κύτταρα NE-4C παρουσιάζουν χαρακτηριστικά νευρικών προγονικών κυττάρων και μπορούν να υποστούν επαγωγή ώστε να διαφοροποιηθούν σε κύτταρα τύπου νευρώνα μέσω της επεξεργασίας με παράγοντες όπως το ρετινοϊκό οξύ, με αποτέλεσμα μορφολογικές και μοριακές αλλαγές που σχετίζονται με τη νευρωνική ωρίμανση.

Κατά τη διάρκεια της διαφοροποίησης, τα κύτταρα NE-4C αναπτύσσουν εκτεταμένες νευριτοειδείς απολήξεις και εκφράζουν νευρωνικούς δείκτες, όπως η βIII-τουμπουλίνη, η MAP2 και οι πρωτεΐνες νευροφιλαμεντών, ανάλογα με το πρωτόκολλο διαφοροποίησης που χρησιμοποιείται. Λόγω της σχετικά ομοιογενούς συμπεριφοράς διαφοροποίησής τους και της αναπαραγώγιμης απόκρισης σε επαγωγικά ερεθίσματα, τα κύτταρα NE-4C χρησιμοποιούνται συνήθως για τη διερεύνηση των οδών σηματοδότησης που εμπλέκονται στη νευρική εξειδίκευση, τη συναπτική ανάπτυξη, τη νευροτοξικότητα, τις αποκρίσεις στο οξειδωτικό στρες και τους νευροπροστατευτικούς μηχανισμούς. Το μοντέλο αυτό έχει επίσης εφαρμοστεί σε μελέτες των μηχανισμών των νευροεκφυλιστικών ασθενειών, της αναπτυξιακής νευροβιολογίας και του ελέγχου ενώσεων που επηρεάζουν τη νευρωνική διαφοροποίηση ή επιβίωση.

Ιστός
Εγκέφαλος, Νευροεκτοδερμικός

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Νευροεπιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
NE-4C (αριθμός καταλόγου Cytion 305182)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_B063

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
Sox-2, Otx-2, En-1

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Ηλικία δωρητή
Έμβρυο