Pereiti prie turinio
NE-4C
Audinys
Smegenys, neuroektodermalinės

Dokumentai

NE-4C

Cell line · Prekės numeris 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

NE-4C ląstelės yra pelių neuroektoderminių kamieninių ląstelių linija, gauta iš pelių embrionų smegenų audinio smegeninių pūslelių. Ši ląstelių linija plačiai pripažįstama dėl savo gebėjimo diferencijuotis į neuronus nustatytomis eksperimentinėmis sąlygomis, todėl ji yra vertingas in vitro modelis neurogenezės, nervų sistemos vystymosi ir neuronų linijos specializacijos tyrimams. NE-4C ląstelės pasižymi nervinių progenitorinių ląstelių savybėmis ir gali būti indukuotos diferencijuotis į neuronams panašias ląsteles, jas veikiant tokiais agentais kaip retinoinė rūgštis, o tai sukelia morfologinius ir molekulinius pokyčius, susijusius su neuronų brendimu.

Diferenciacijos metu NE-4C ląstelės išaugina išilginius neuritams panašius ataugus ir, priklausomai nuo taikomo diferenciacijos protokolo, ekspresuoja neuroninius žymeklius, įskaitant βIII-tubuliną, MAP2 ir neurofilamentų baltymus. Dėl savo palyginti vienodo diferenciacijos elgesio ir atkartojamo atsako į indukcinius dirgiklius NE-4C ląstelės dažnai naudojamos signalinių kelių, susijusių su nervų ląstelių specifikacija, sinapsų vystymusi, neurotoksiniu poveikiu, oksidacinio streso reakcijomis ir neuroprotektiniais mechanizmais, tyrimams. Šis modelis taip pat taikomas neurodegeneracinių ligų mechanizmų, vystymosi neurobiologijos tyrimams bei junginių, veikiančių neuronų diferenciaciją ar išlikimą, atrankai.

Audinys
Smegenys, neuroektodermalinės

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Neuroepitelinis

04Identifikatoriai

Nuoroda
NE-4C (Cytion katalogo numeris 305182)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Sox-2, Otx-2, En-1

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Donoro amžius
Embrionas