Prejsť na obsah
NE-4C
Tkanivo
Mozog, neuroektodermálny

Dokumenty

NE-4C

Cell line · Číslo výrobku 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky NE-4C sú myšia línia neuroektodermálnych kmeňových buniek odvodená z mozgových vezikulov embryonálnej tkaniny myšieho mozgu. Táto bunková línia je všeobecne uznávaná pre svoju schopnosť podstúpiť neurónovú diferenciáciu za definovaných experimentálnych podmienok, čo z nej robí cenný in vitro model pre štúdium neurogénie, neurálneho vývoja a určovania neurónovej línie. Bunky NE-4C vykazujú charakteristiky neurálnych progenitorových buniek a ich diferenciáciu na neurónové bunky je možné indukovať pôsobením látok, ako je kyselina retinová, čo vedie k morfologickým a molekulárnym zmenám spojeným s neurónovým dozrievaním.

Počas diferenciácie vyvíjajú bunky NE-4C predĺžené výbežky podobné neuritom a exprimujú neurónové markery, vrátane βIII-tubulínu, MAP2 a neurofilamentových proteínov, v závislosti od použitého diferenciačného protokolu. Vďaka svojmu relatívne homogénnemu diferenciačnému správaniu a reprodukovateľnej reakcii na indukčné podnety sa bunky NE-4C bežne používajú na skúmanie signálnych dráh zapojených do neurálnej špecifikácie, vývoja synáps, neurotoxicity, reakcií na oxidačný stres a neuroprotektívnych mechanizmov. Tento model sa tiež uplatňuje v štúdiách mechanizmov neurodegeneratívnych ochorení, vývojovej neurobiológie a pri skríningu zlúčenín ovplyvňujúcich diferenciáciu alebo prežitie neurónov.

Tkanivo
Mozog, neuroektodermálny

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Neuroepiteliálny

04Identifikátory

Citácia
NE-4C (katalógové číslo Cytion 305182)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
Sox-2, Otx-2, En-1

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6 × 129/Sv-Trp53-/-
Vek darcu
Embryo