Tartalomra ugrás
NE-4C
Szövet
Agy, neuroektodermális

Dokumentumok

NE-4C

Cell line · Termékszám 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A NE-4C sejtek egy egér neuroektodermális őssejtvonal, amelyet embrionális egér agyszövet agyi hólyagjaiból nyertek ki. A sejtvonalat széles körben elismerik azon képessége miatt, hogy meghatározott kísérleti körülmények között idegsejtekké differenciálódik, ami értékes in vitro modellé teszi a neurogenezis, az idegrendszeri fejlődés és az idegsejt-vonal kialakulásának vizsgálatához. A NE-4C sejtek az idegelősejtek jellemzőit mutatják, és olyan hatóanyagokkal, mint például a retinsav, indukálhatók neuron-szerű sejtekké történő differenciálódásra, ami az idegsejtek éréséhez kapcsolódó morfológiai és molekuláris változásokat eredményez.

A differenciálódás során a NE-4C sejtek kiterjedt neurit-szerű nyúlványokat fejlesztenek ki, és a használt differenciálódási protokolltól függően neuronális markereket fejeznek ki, többek között βIII-tubulint, MAP2-t és neurofilament fehérjéket. Viszonylag homogén differenciálódási viselkedésük és az induktív ingerekre adott reprodukálható válaszuk miatt a NE-4C sejteket széles körben használják az idegrendszeri specializációban, a szinaptikus fejlődésben, a neurotoxicitásban, az oxidatív stresszre adott válaszokban és a neuroprotektív mechanizmusokban részt vevő jelátviteli útvonalak vizsgálatára. A modellt alkalmazták továbbá a neurodegeneratív betegségek mechanizmusainak, a fejlődési neurobiológiának, valamint az idegsejt-differenciálódást vagy túlélést befolyásoló vegyületek szűrésének vizsgálatában is.

Szövet
Agy, neuroektodermális

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Neuroepiteliális

04Azonosítók

Hivatkozás
NE-4C (Cytion katalógusszám: 305182)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
Sox-2, Otx-2, En-1

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Az adományozó életkora
Embrió