Gå til innholdet
NE-4C
Vev
Hjerne, nevroektodermal

Dokumenter

NE-4C

Cell line · Produktnummer 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

NE-4C-celler er en murin nevroektodermal stamcellelinje som stammer fra hjerneblærene i embryonalt musehjernevev. Cellelinjen er allment anerkjent for sin evne til å gjennomgå nevronaldifferensiering under definerte eksperimentelle forhold, noe som gjør den til en verdifull in vitro-modell for studier av nevrogenese, nevral utvikling og nevronalt linjevalg. NE-4C-celler viser egenskaper som er typiske for nevrale stamceller og kan induseres til å differensiere seg til nevronlignende celler ved behandling med midler som retinsyre, noe som resulterer i morfologiske og molekylære endringer forbundet med nevronmodning.

Under differensieringen utvikler NE-4C-celler utstrakte nevrittlignende utvekster og uttrykker nevronale markører, inkludert βIII-tubulin, MAP2 og nevrofilamentproteiner, avhengig av hvilket differensieringsprotokoll som benyttes. På grunn av deres relativt homogene differensieringsatferd og reproduserbare respons på induktive stimuli, brukes NE-4C-celler ofte til å undersøke signalveier involvert i nevral spesifikasjon, synaptisk utvikling, nevrotoksisitet, oksidativt stressrespons og nevrobeskyttende mekanismer. Modellen har også blitt brukt i studier av mekanismer ved nevrodegenerative sykdommer, utviklingsneurobiologi og screening av forbindelser som påvirker nevronaldifferensiering eller overlevelse.

Vev
Hjerne, nevroektodermal

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Nevroepitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NE-4C (Cytion katalognummer 305182)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
Sox-2, Otx-2, En-1

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Donorens alder
Embryo