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NE-4C
Pañuelo de papel
Cerebro, neuroectodérmico

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NE-4C

Cell line · Número de producto 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00sin impuestos ni gastos de envío

Personalización / Recomendaciones

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Recomendado (lote más fresco)
1

01Información general

Descripción

Las células NE-4C son una línea celular madre neuroectodérmica murina derivada de las vesículas cerebrales del tejido cerebral embrionario de ratón. Esta línea celular es ampliamente reconocida por su capacidad para diferenciarse en neuronas en condiciones experimentales definidas, lo que la convierte en un valioso modelo in vitro para el estudio de la neurogénesis, el desarrollo neural y la determinación del linaje neuronal. Las células NE-4C presentan características de las células progenitoras neurales y pueden inducirse a diferenciarse en células de tipo neuronal mediante el tratamiento con agentes como el ácido retinoico, lo que da lugar a cambios morfológicos y moleculares asociados a la maduración neuronal.

Durante la diferenciación, las células NE-4C desarrollan prolongaciones similares a neuritas y expresan marcadores neuronales como la βIII-tubulina, la MAP2 y las proteínas de neurofilamentos, dependiendo del protocolo de diferenciación empleado. Debido a su comportamiento de diferenciación relativamente homogéneo y a su respuesta reproducible a los estímulos inductivos, las células NE-4C se utilizan habitualmente para investigar las vías de señalización implicadas en la especificación neural, el desarrollo sináptico, la neurotoxicidad, las respuestas al estrés oxidativo y los mecanismos neuroprotectores. Este modelo también se ha aplicado en estudios sobre los mecanismos de las enfermedades neurodegenerativas, la neurobiología del desarrollo y el cribado de compuestos que afectan a la diferenciación o la supervivencia neuronal.

Pañuelo de papel
Cerebro, neuroectodérmico

02Clasificación

Organismo
Ratón
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Neuroepitelial

04Identificadores

Referencia
NE-4C (número de catálogo 305182 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
Sox-2, Otx-2, En-1

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
De 1 a 3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Edad del donante
Embrión