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NE-4C
Tecido
Cérebro, neuroectodérmico

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NE-4C

Cell line · Número do produto 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição

As células NE-4C são uma linha celular de células estaminais neuroectodérmicas murinas derivadas das vesículas cerebrais do tecido cerebral embrionário de ratinho. Esta linha celular é amplamente reconhecida pela sua capacidade de sofrer diferenciação neuronal em condições experimentais definidas, o que a torna um modelo in vitro valioso para estudos sobre neurogénese, desenvolvimento neural e comprometimento da linhagem neuronal. As células NE-4C apresentam características de células progenitoras neurais e podem ser induzidas a diferenciar-se em células semelhantes a neurónios através do tratamento com agentes como o ácido retinóico, resultando em alterações morfológicas e moleculares associadas à maturação neuronal.

Durante a diferenciação, as células NE-4C desenvolvem processos alongados semelhantes a neuritos e expressam marcadores neuronais, incluindo βIII-tubulina, MAP2 e proteínas de neurofilamentos, dependendo do protocolo de diferenciação utilizado. Devido ao seu comportamento de diferenciação relativamente homogéneo e à resposta reprodutível a estímulos indutores, as células NE-4C são frequentemente utilizadas para investigar vias de sinalização envolvidas na especificação neural, no desenvolvimento sináptico, na neurotoxicidade, nas respostas ao stress oxidativo e nos mecanismos neuroprotetores. Este modelo também tem sido aplicado em estudos sobre os mecanismos das doenças neurodegenerativas, neurobiologia do desenvolvimento e triagem de compostos que afetam a diferenciação ou a sobrevivência neuronal.

Tecido
Cérebro, neuroectodérmico

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Neuroepitelial

04Identificadores

Referência
NE-4C (número de catálogo da Cytion 305182)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Sox-2, Otx-2, En-1

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Idade do dador
Embrião