Gå direkt till innehållet
NE-4C
Vävnad
Hjärna, neuroektodermal

NE-4C

Cell line · Produktnummer 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

NE-4C-celler är en neuroektodermal stamcellslinje från mus, som härrör från hjärnblåsorna i embryonalt musvävnad. Cellinjen är allmänt erkänd för sin förmåga att genomgå neuronal differentiering under definierade experimentella förhållanden, vilket gör den till en värdefull in vitro-modell för studier av neurogenes, nervutveckling och neuronalt linjeval. NE-4C-celler uppvisar egenskaper som är typiska för neurala progenitorceller och kan induceras att differentieras till neuronliknande celler genom behandling med ämnen såsom retinsyra, vilket resulterar i morfologiska och molekylära förändringar som är förknippade med neuronal mognad.

Under differentieringen utvecklar NE-4C-celler utsträckta neuritliknande utskott och uttrycker neuronala markörer, däribland βIII-tubulin, MAP2 och neurofilamentproteiner, beroende på vilket differentieringsprotokoll som används. På grund av sitt relativt homogena differentieringsbeteende och reproducerbara svar på inducerande stimuli används NE-4C-celler ofta för att undersöka signalvägar som är involverade i neural specificering, synaptisk utveckling, neurotoxicitet, reaktioner på oxidativ stress och neuroprotektiva mekanismer. Modellen har även använts i studier av mekanismerna bakom neurodegenerativa sjukdomar, utvecklingsneurobiologi samt screening av föreningar som påverkar neuronernas differentiering eller överlevnad.

Vävnad
Hjärna, neuroektodermal

02Klassificering

Organism
Mus
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Neuroepitelial

04Identifierare

Källa
NE-4C (Cytion katalognummer 305182)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Uttryck och mottaglighet

Antigenuttryck
Sox-2, Otx-2, En-1

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 till 3 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Donatorns ålder
Embryo