الانتقال إلى المحتوى
NE-4C
الأنسجة
الدماغ، الأدمة العصبية

المستندات

NE-4C

Cell line · رقم المنتج 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

خلايا NE-4C هي سلالة خلايا جذعية عصبية خارجية من الفئران، مستمدة من الحويصلات الدماغية في أنسجة دماغ الفأر الجنيني. وتشتهر هذه السلالة الخلوية على نطاق واسع بقدرتها على الخضوع للتمايز العصبي في ظل ظروف تجريبية محددة، مما يجعلها نموذجًا مختبريًّا قيّمًا لدراسات تكوين الخلايا العصبية، والتطور العصبي، وتخصيص السلالة العصبية. تُظهر خلايا NE-4C خصائص الخلايا السلفية العصبية ويمكن تحفيزها على التمايز إلى خلايا شبيهة بالخلايا العصبية من خلال المعالجة بعوامل مثل حمض الريتينويك، مما يؤدي إلى تغيرات مورفولوجية وجزيئية مرتبطة بنضج الخلايا العصبية.

أثناء عملية التمايز، تُنشئ خلايا NE-4C نتوءات ممتدة تشبه النيوريتات وتُعبّر عن علامات عصبية تشمل بروتينات βIII-توبولين وMAP2 وبروتينات النيوروفيلامنت، اعتمادًا على بروتوكول التمايز المستخدم. ونظرًا لسلوكها التمايزي المتجانس نسبيًّا واستجابتها القابلة للتكرار للمحفزات التحفيزية، تُستخدم خلايا NE-4C عادةً لدراسة مسارات الإشارات المشاركة في التخصيص العصبي، وتطور المشابك العصبية، والسمية العصبية، واستجابات الإجهاد التأكسدي، وآليات الحماية العصبية. كما تم تطبيق هذا النموذج في دراسات آليات الأمراض العصبية التنكسية، وعلم الأحياء العصبي التنموي، وفحص المركبات التي تؤثر على تمايز الخلايا العصبية أو بقائها.

الأنسجة
الدماغ، الأدمة العصبية

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
عصبي-ظهاري

04المعرّفات

المرجع
NE-4C (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305182)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_B063

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
Sox-2، Otx-2، En-1

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 إلى 3 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
C57BL/6 × 129/Sv-Trp53-/-
عمر المتبرع
الجنين