Preskoči na vsebino
NE-4C
Tkivo
Možgani, nevroektoderm

Dokumenti

NE-4C

Cell line · Številka izdelka 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celice NE-4C so linija mišjih nevroektodermalnih izvornih celic, pridobljenih iz možganskih mehurčkov zarodnega možganskega tkiva miši. Ta celična linija je splošno priznana po svoji sposobnosti, da se v določenih eksperimentalnih pogojih diferencira v nevrone, kar jo naredi za dragocen in vitro model za raziskave nevrogeneze, nevralnega razvoja in usmerjanja nevronske linije. Celice NE-4C kažejo značilnosti nevralnih progenitornih celic in jih je mogoče s pomočjo snovi, kot je retinoinska kislina, spodbuditi k diferenciaciji v nevronske celice, kar povzroči morfološke in molekularne spremembe, povezane z nevronskim zorenjem.

Med diferenciacijo celice NE-4C razvijejo podaljšane nevritu podobne izrastke in izražajo nevronske markerje, vključno z βIII-tubulinom, MAP2 in nevrofilamentnimi proteini, odvisno od uporabljenega protokola diferenciacije. Zaradi svojega relativno homogenega obnašanja pri diferenciaciji in ponovljivega odziva na induktivne dražljaje se celice NE-4C pogosto uporabljajo za preučevanje signalnih poti, vpletenih v nevronsko specifikacijo, razvoj sinaps, nevrotoksičnost, odzive na oksidativni stres in nevrozaščitne mehanizme. Model se uporablja tudi v študijah mehanizmov nevrodegenerativnih bolezni, razvojne nevrobiologije ter pri presejanju spojin, ki vplivajo na nevronsko diferenciacijo ali preživetje.

Tkivo
Možgani, nevroektoderm

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Nevroepitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
NE-4C (kataloška številka Cytion 305182)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_B063

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Sox-2, Otx-2, En-1

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
C57BL/6 x 129/Sv-Trp53-/-
Starost darovalca
Zarodek