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NE-4C
티슈
뇌, 신경외배엽

NE-4C

Cell line · 제품 번호 305182

NE-4C cells are a murine neuroectodermal stem cell line derived from the cerebral vesicles of embryonic mouse brain tissue. The cell line is widely recogn...

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01일반 정보

설명

NE-4C 세포는 생쥐 배아 뇌 조직의 뇌낭에서 유래한 생쥐 신경외배엽 줄기세포주입니다. 이 세포주는 특정 실험 조건 하에서 신경세포 분화를 일으킬 수 있는 능력으로 널리 알려져 있어, 신경 발생, 신경 발달 및 신경 계통 결정 연구를 위한 귀중한 체외 모델로 활용되고 있습니다. NE-4C 세포는 신경 전구세포의 특성을 나타내며, 레티노산과 같은 약제를 처리함으로써 신경세포 유사 세포로 분화될 수 있으며, 이로 인해 신경세포 성숙과 관련된 형태학적 및 분자적 변화가 나타납니다.

분화 과정에서 NE-4C 세포는 길게 뻗은 신경돌기 유사 돌기를 형성하며, 적용된 분화 프로토콜에 따라 βIII-튜불린, MAP2, 신경필라멘트 단백질 등의 신경 마커를 발현합니다. NE-4C 세포는 비교적 균일한 분화 행동과 유도 자극에 대한 재현 가능한 반응을 보이기 때문에, 신경 특이화, 시냅스 발달, 신경독성, 산화 스트레스 반응 및 신경 보호 기전에 관여하는 신호 전달 경로를 연구하는 데 널리 사용됩니다. 또한 이 모델은 신경퇴행성 질환의 기전 연구, 발달 신경생물학 연구, 그리고 신경 세포의 분화나 생존에 영향을 미치는 화합물의 스크리닝 연구에도 적용되어 왔습니다.

티슈
뇌, 신경외배엽

02분류

생물체
마우스
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
신경상피

04식별자

인용
NE-4C (Cytion 카탈로그 번호 305182)
NCBI 세금 식별번호
10090
셀로사우루스
CVCL_B063

05발현 및 감수성

항원 발현
Sox-2, Otx-2, En-1

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
1~3 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
C57BL/6 × 129/Sv-Trp53-/-
기증자 연령
Embryo