Skip to content
Neuro-2a-Luc
Tissue
מערכת העצבים ההיקפית
Disease
נוירובלסטומה
Synonyms
Neuro2A-Luc

Documents

Neuro-2a-Luc

Cell line · Product number 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Neuro-2a-Luc הוא נגזרת של קו תאי הנוירובלסטומה Neuro-2a (N2a) של עכבר, המבטאת לוקיפרז. תאי Neuro-2a מקורם ברקמת נוירובלסטומה שמקורה בקשת העצבית של עכברים, והם נמצאים בשימוש נרחב כמודל במבחנה להבחנה עצבית, למחקרי נוירוטוקסיות, למחקר העברת אותות ולמחקרים בנוירו-אונקולוגיה. ביטוי יציב של רפורט לוספראז מאפשר זיהוי ביולומינסצנטי רגיש וכמותי של תאים חיים ופעילות תאית, מה שהופך את Neuro-2a-Luc לשימושי במיוחד לניטור ארוך טווח במערכות ניסוייות במבחנה ובחיות. בהתאם לעיצוב הרפורט, ביטוי הלוספראז עשוי להיות קבוע או קשור לפעילות מקדם ספציפית למסלול.

תאי Neuro-2a-Luc משמשים בדרך כלל ביישומים הכוללים מעקב אחר צמיחת גידולים, סינון תרופות בתפוקה גבוהה, בדיקות התמיינות עצבית והערכה בזמן אמת של תגובות טיפוליות. במודלים של שתלים זרים וגרורות, הדמיה ביולומינסצנטית מבוססת לוקיפרז מאפשרת ניטור לא פולשני של עומס הגידול והתקדמות המחלה ברגישות גבוהה. מערכות הנגזרות מ-Neuro-2a משמשות גם באופן נרחב לחקר מורפולוגיה עצבית, צמיחת נוירונים, אפופטוזיס, לחץ חמצוני ומנגנונים הקשורים למחלות ניווניות. השינוי בלוקיפרז מאפשר ניתוח כמותי מהיר של שגשוג תאים, ציטוטוקסיות, פעילות תעתיקית או ויסות מסלולים בתגובה להפרעות פרמקולוגיות או גנטיות.

כמו בקווי תאים מדווחים מהונדסים אחרים, הביצועים הניסויים של Neuro-2a-Luc עשויים להיות תלויים בגורמים כגון אתר שילוב הקונסטרוקט של לוקיפרז, תצורת הפרומוטור, תאימות המצע ויציבות הביטוי של המדווח לאורך מעברים סדרתיים. ייתכן שיידרשו נתוני אפיון נוספים, כולל פרטים לגבי וריאנט הלוקיפרז, סמן הבחירה ובדיקות האימות, עבור יישומים ניסויים מתמחים ביותר.

Tissue
מערכת העצבים ההיקפית
Disease
נוירובלסטומה
Synonyms
  • Neuro2A-Luc

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
תאי גזע עצביים ואמבוציים

04Identifiers

Citation
Neuro-2a-Luc (מספר קטלוגי של Cytion: 305690)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
Viruses
נגיף אקטרומליה (אבעבועות עכברים): שלילי
Virus resistance
נגיף הפוליו 1
Reverse transcriptase
שלילי
Products
טובולין, אצטילכולין אסטראז

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 עד 3 × 10⁴ תאים לסמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.