Siirry sisältöön
Neuro-2a-Luc
Kudos
Ääreishermosto
Sairaus
Neuroblastooma
Synonyymit
Neuro2A-Luc

Asiakirjat

Neuro-2a-Luc

Cell line · Tuotenumero 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Neuro-2a-Luc on lusiferaasia ilmentävä johdannainen Neuro-2a (N2a) -hiiren neuroblastoomasolulinjasta. Neuro-2a-solut ovat peräisin hiiren hermorivistä peräisin olevasta neuroblastoomakudoksesta, ja niitä käytetään laajalti in vitro -mallina hermosolujen erilaistumisen, neurotoksisuustutkimusten, signaalinsiirtotutkimusten ja neuroonkologisten tutkimusten yhteydessä. Lusiferaasi-ilmaisimen vakaa ilmentyminen mahdollistaa elävien solujen ja solutoiminnan herkän, kvantitatiivisen bioluminesenssidetektiivisen mittaamisen, mikä tekee Neuro-2a-Lucista erityisen hyödyllisen pitkittäistutkimuksiin sekä in vitro- että in vivo -kokeellisissa järjestelmissä. Ilmaisimen rakenteesta riippuen lusiferaasin ilmentyminen voi olla konstitutiivista tai sidoksissa tiettyyn signaalireitin promootoriin.

Neuro-2a-Luc-soluja käytetään yleisesti sovelluksissa, joihin liittyy kasvaimen kasvun seuranta, suurikapasiteettinen lääkeaineiden seulonta, hermosolujen erilaistumistestit ja terapeuttisten vasteiden reaaliaikainen arviointi. Ksenotransplantaatti- ja etäpesäkemalleissa lusiferaasipohjainen bioluminesenssikuvantaminen mahdollistaa kasvaimen kuormituksen ja taudin etenemisen ei-invasiivisen seurannan suurella herkkyydellä. Neuro-2a-johdettuja järjestelmiä käytetään myös laajasti hermosolujen morfologian, hermosolujen kasvun, apoptoosin, oksidatiivisen stressin ja neurodegeneratiivisiin sairauksiin liittyvien mekanismien tutkimiseen. Lusiferaasimodifikaatio helpottaa solujen proliferaation, sytotoksisuuden, transkriptioaktiivisuuden tai reittien modulaation nopeaa kvantitatiivista analysointia vasteena farmakologisille tai geneettisille häiriöille.

Kuten muiden muunneltujen raporttisolulinjojen kohdalla, Neuro-2a-Lucin kokeellinen suorituskyky voi riippua tekijöistä, kuten lusiferaasikonstruktin integrointikohdasta, promoottorin konfiguraatiosta, substraatin yhteensopivuudesta ja raporttigeenin ilmentymisen vakaudesta peräkkäisten siirtojen aikana. Erittäin erikoistuneissa kokeellisissa sovelluksissa saatetaan tarvita lisätietoja, kuten yksityiskohtia lusiferaasivariantista, valintamarkkerista ja validointitesteistä.

Kudos
Ääreishermosto
Sairaus
Neuroblastooma
Synonyymit
  • Neuro2A-Luc

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Neuronaaliset ja amoeboidiset kantasolut

04Tunnisteet

Lähdeviite
Neuro-2a-Luc (Cytion-tuotenumero 305690)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)
Virukset
Ectromelia-virus (hiiren rokko): negatiivinen
Virusten kestävyys
Poliovirus 1
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
Tubuliini, asetyylikoliiniesteraasi

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.