Neuro-2a-Luc
Cell line · Preces numurs 305690
Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...
Pielāgošana / Ieteikumi
- Neuro-2a-LucCell line€800.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
Neuro-2a-Luc ir peles neiroblastomas šūnu līnijas Neuro-2a (N2a) atvasinājums, kas ekspresē luciferāzi. Neuro-2a šūnas ir iegūtas no peles neirokrāsta izcelsmes neiroblastomas audiem un tiek plaši izmantotas kā in vitro modelis neironu diferenciācijai, neirotoksicitātes pētījumiem, signālu pārneses izpētei un neiroonkoloģijas pētījumiem. Stabila luciferāzes reportera ekspresija ļauj jutīgi un kvantitatīvi bioluminiscences ceļā noteikt dzīvotspējīgas šūnas un šūnu aktivitāti, padarot Neuro-2a-Luc īpaši noderīgu gareniskai uzraudzībai gan in vitro, gan in vivo eksperimentālās sistēmās. Atkarībā no reportera dizaina luciferāzes ekspresija var būt konstitutīva vai saistīta ar ceļam specifisku promotora aktivitāti.
Neuro-2a-Luc šūnas parasti izmanto lietojumos, kas saistīti ar audzēja izaugsmes izsekošanu, augstas caurlaidspējas zāļu skrīningu, neironu diferenciācijas testiem un terapeitiskās reakcijas novērtēšanu reālajā laikā. Ksenotransplantātu un metastāžu modeļos uz luciferāzi balstīta bioluminiscences attēlveidošana ļauj neinvazīvi uzraudzīt audzēja apjomu un slimības progresēšanu ar augstu jutību. No Neuro-2a atvasinātās sistēmas tiek plaši izmantotas arī neironu morfoloģijas, neirītu izaugšanas, apoptozes, oksidatīvā stresa un ar neirodeģeneratīvām slimībām saistītu mehānismu pētīšanai. Luciferāzes modifikācija atvieglo ātru kvantitatīvo analīzi par šūnu proliferāciju, citotoksicitāti, transkripcijas aktivitāti vai ceļu modulāciju atbildē uz farmakoloģiskiem vai ģenētiskiem traucējumiem.
Tāpat kā citām inženierijas ceļā radītām reporteru šūnu līnijām, Neuro-2a-Luc eksperimentālā veiktspēja var būt atkarīga no tādiem faktoriem kā luciferāzes konstrukcijas integrācijas vieta, promotora konfigurācija, substrāta saderība un reporteru ekspresijas stabilitāte sērijveida pasāžās. Īpaši specializētiem eksperimentāliem pielietojumiem var būt nepieciešami papildu raksturojuma dati, tostarp informācija par luciferāzes variantu, selekcijas marķieri un validācijas testiem.
- Audums
- Perifērā nervu sistēma
- Slimība
- Neuroblastoma
- Sinonīmi
- Neuro2A-Luc
02Klasifikācija
- Organisms
- Pele
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Šūnu tips
- Neironu un ameboīdu cilmes šūnas
04Identifikatori
- Atsauce
- Neuro-2a-Luc (Cytion kataloga numurs 305690)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_K046
05Pazīmes un uzņēmība
- Antigēna ekspresija
- Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
- Vīrusi
- Ektromēlijas vīruss (peļu bakas): negatīvs
- Izturība pret vīrusiem
- Poliovīruss 1
- Reversā transkriptāze
- Negatīvs
- Produkti
- Tubulīns, acetilholīnesterāze
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 1 līdz 3 x 10⁴ šūnas/cm²
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
