Přejít na obsah
Neuro-2a-Luc
Tkáň
Periferní nervový systém
Nemoc
Neuroblastom
Synonyma
Neuro2A-Luc

Dokumenty

Neuro-2a-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Neuro-2a-Luc je derivát myší buněčné linie neuroblastomu Neuro-2a (N2a), který exprimuje luciferázu. Buňky Neuro-2a pocházejí z tkáně myšího neuroblastomu odvozeného z neurální lišty a jsou široce využívány jako in vitro model pro diferenciaci neuronů, studie neurotoxicity, výzkum signální transdukce a neuroonkologické výzkumy. Stabilní exprese luciferázového reportéru umožňuje citlivou, kvantitativní bioluminiscenční detekci životaschopných buněk a buněčné aktivity, díky čemuž je Neuro-2a-Luc obzvláště užitečný pro longitudinální monitorování v experimentálních systémech in vitro i in vivo. V závislosti na konstrukci reportéru může být exprese luciferázy konstitutivní nebo vázaná na aktivitu promotoru specifického pro danou signální dráhu.

Buňky Neuro-2a-Luc se běžně používají v aplikacích zahrnujících sledování růstu nádorů, vysoce výkonné screeningy léčiv, testy neurální diferenciace a hodnocení terapeutických reakcí v reálném čase. V modelech xenotransplantátů a metastáz umožňuje bioluminiscenční zobrazování založené na luciferáze neinvazivní monitorování nádorové zátěže a progrese onemocnění s vysokou citlivostí. Systémy odvozené od Neuro-2a se také hojně používají ke studiu neuronální morfologie, růstu neuritů, apoptózy, oxidačního stresu a mechanismů spojených s neurodegenerativními onemocněními. Modifikace luciferázy usnadňuje rychlou kvantitativní analýzu buněčné proliferace, cytotoxicity, transkripční aktivity nebo modulace signálních drah v reakci na farmakologické nebo genetické zásahy.

Stejně jako u jiných modifikovaných reportérových buněčných linií může experimentální výkonnost Neuro-2a-Luc záviset na faktorech, jako je místo integrace luciferázového konstruktu, konfigurace promotoru, kompatibilita substrátu a stabilita exprese reportéru během sériových pasáží. Pro vysoce specializované experimentální aplikace mohou být vyžadovány další charakterizační údaje, včetně podrobností týkajících se varianty luciferázy, selekčního markeru a validačních testů.

Tkáň
Periferní nervový systém
Nemoc
Neuroblastom
Synonyma
  • Neuro2A-Luc

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Neuronální a améboidní kmenové buňky

04Identifikátory

Citace
Neuro-2a-Luc (katalogové číslo Cytion 305690)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Luc2 (světluška, s optimalizovanými kodony)
Viry
Virus ektromelie (myší neštovice): negativní
Odolnost vůči virům
Poliovirus 1
Reverzní transkriptáza
Negativní
Produkty
Tubulin, acetylcholinesteráza

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.