Przejdź do treści
Neuro-2a-Luc
Chusteczka
Obwodowy układ nerwowy
Choroba
Neuroblastoma
Synonimy
Neuro2A-Luc

Dokumenty

Neuro-2a-Luc

Cell line · Numer produktu 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Neuro-2a-Luc to pochodna mysiej linii komórkowej neuroblastoma Neuro-2a (N2a), w której ekspresjonowana jest lucyferaza. Komórki Neuro-2a pochodzą z tkanki neuroblastoma wywodzącej się z grzebienia nerwowego myszy i są szeroko stosowane jako model in vitro do badań nad różnicowaniem neuronów, neurotoksycznością, transdukcją sygnałów oraz w badaniach neuroonkologicznych. Stabilna ekspresja reporterowej lucyferazy umożliwia czułe, ilościowe wykrywanie bioluminescencyjne żywych komórek i aktywności komórkowej, co sprawia, że Neuro-2a-Luc jest szczególnie przydatny do monitorowania w czasie w systemach eksperymentalnych zarówno in vitro, jak i in vivo. W zależności od konstrukcji reporteru ekspresja lucyferazy może być konstytutywna lub powiązana z aktywnością promotora specyficznego dla danego szlaku.

Komórki Neuro-2a-Luc są powszechnie stosowane w zastosowaniach związanych ze śledzeniem wzrostu nowotworów, wysokoprzepustowym przesiewaniem leków, testami różnicowania neuronów oraz oceną odpowiedzi terapeutycznej w czasie rzeczywistym. W modelach przeszczepów heterogenicznych i przerzutów obrazowanie bioluminescencyjne oparte na lucyferazie pozwala na nieinwazyjne monitorowanie obciążenia nowotworowego i postępu choroby z wysoką czułością. Systemy pochodne Neuro-2a są również szeroko stosowane do badania morfologii neuronów, wzrostu neuritów, apoptozy, stresu oksydacyjnego oraz mechanizmów związanych z chorobami neurodegeneracyjnymi. Modyfikacja lucyferazy ułatwia szybką analizę ilościową proliferacji komórek, cytotoksyczności, aktywności transkrypcyjnej lub modulacji szlaków w odpowiedzi na zaburzenia farmakologiczne lub genetyczne.

Podobnie jak w przypadku innych zmodyfikowanych linii komórkowych reporterowych, wydajność eksperymentalna Neuro-2a-Luc może zależeć od czynników, takich jak miejsce integracji konstruktu lucyferazy, konfiguracja promotora, kompatybilność substratu oraz stabilność ekspresji reportera podczas kolejnych pasażowań. W przypadku wysoce specjalistycznych zastosowań eksperymentalnych mogą być wymagane dodatkowe dane charakterystyczne, w tym szczegóły dotyczące wariantu lucyferazy, markera selekcyjnego oraz testów walidacyjnych.

Chusteczka
Obwodowy układ nerwowy
Choroba
Neuroblastoma
Synonimy
  • Neuro2A-Luc

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Typ komórki
Neuronalne i ameboidalne komórki macierzyste

04Identyfikatory

Źródło
Neuro-2a-Luc (nr katalogowy Cytion 305690)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)
Wirusy
Wirus ektromelii (ospa myszy): negatywny
Odporność na wirusy
Poliowirus 1
Transkryptaza odwrotna
Negatywny
Produkty
Tubulina, acetylocholinoesteraza

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.