İçeriğe atla
Neuro-2a-Luc
Doku
Periferik sinir sistemi
Hastalık
Nöroblastom
Eş anlamlılar
Neuro2A-Luc

Neuro-2a-Luc

Cell line · Ürün numarası 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Neuro-2a-Luc, Neuro-2a (N2a) fare nöroblastom hücre hattının lusiferaz eksprese eden bir türevidir. Neuro-2a hücreleri, fare nöral kret kaynaklı nöroblastom dokusundan elde edilir ve nöronal farklılaşma, nörotoksisite çalışmaları, sinyal iletim araştırmaları ve nöro-onkoloji incelemeleri için yaygın olarak kullanılan bir in vitro modeldir. Lüseraz raportörünün stabil ekspresyonu, canlı hücrelerin ve hücresel aktivitenin hassas, kantitatif biyolüminesan tespitini mümkün kılar, bu da Neuro-2a-Luc'u hem in vitro hem de in vivo deney sistemlerinde uzun süreli izleme için özellikle kullanışlı hale getirir. Raportör tasarımına bağlı olarak, lüseraz ekspresyonu konstitütif olabilir veya yolak spesifik promotör aktivitesine bağlı olabilir.

Neuro-2a-Luc hücreleri, tümör büyümesinin izlenmesi, yüksek verimli ilaç taraması, nöral farklılaşma testleri ve terapötik yanıtların gerçek zamanlı değerlendirilmesini içeren uygulamalarda yaygın olarak kullanılır. Ksenograft ve metastaz modellerinde, lusiferaz tabanlı biyolüminesan görüntüleme, tümör yükünün ve hastalığın ilerlemesinin yüksek hassasiyetle noninvaziv olarak izlenmesini sağlar. Neuro-2a kaynaklı sistemler ayrıca nöronal morfoloji, nörit uzaması, apoptoz, oksidatif stres ve nörodejeneratif hastalıklarla ilişkili mekanizmaların incelenmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Lusiferaz modifikasyonu, farmakolojik veya genetik bozulmalara yanıt olarak hücre proliferasyonu, sitotoksisite, transkripsiyonel aktivite veya yolak modülasyonunun hızlı kantitatif analizini kolaylaştırır.

Diğer mühendislik ürünü raportör hücre hatlarında olduğu gibi, Neuro-2a-Luc'un deneysel performansı, lusiferaz konstrüksiyonunun entegrasyon bölgesi, promotör konfigürasyonu, substrat uyumluluğu ve seri pasajlar boyunca raportör ekspresyonunun stabilitesi gibi faktörlere bağlı olabilir. Lusiferaz varyantı, seleksiyon markörü ve validasyon testleri ile ilgili ayrıntılar dahil olmak üzere ek karakterizasyon verileri, son derece özel deneysel uygulamalar için gerekli olabilir.

Doku
Periferik sinir sistemi
Hastalık
Nöroblastom
Eş anlamlılar
  • Neuro2A-Luc

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
Nöronal ve amoeboid kök hücreler

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
Neuro-2a-Luc (Cytion katalog numarası 305690)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)
Virüsler
Ektromelia virüsü (fare çiçeği): negatif
Virüs direnci
Poliovirüs 1
Ters transkriptaz
Negatif
Ürünler
Tubulin, asetilkolinesteraz

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 10⁴ hücre/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.