Mine otse sisu juurde
Neuro-2a-Luc
Kude
Perifeerne närvisüsteem
Haigus
Neuroblastoom
Sünonüümid
Neuro2A-Luc

Dokumendid

Neuro-2a-Luc

Cell line · Toote number 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Neuro-2a-Luc on hiire neuroblastoomi rakuliini Neuro-2a (N2a) lucifereesi ekspresseeriv derivaat. Neuro-2a rakud pärinevad hiire neuraalkreestist saadud neuroblastoomi koest ning neid kasutatakse laialdaselt in vitro mudelina neuronite diferentseerumise, neurotoksilisuse uuringute, signaaliülekande uurimise ja neuroonkoloogiliste uuringute jaoks. Lusiferaasi reportergeeni stabiilne ekspressioon võimaldab eluvõimeliste rakkude ja rakulise aktiivsuse tundlikku, kvantitatiivset bioluminestsentsdetekteerimist, mis teeb Neuro-2a-Luc-i eriti kasulikuks pikaajaliseks jälgimiseks nii in vitro kui ka in vivo eksperimentaalsetes süsteemides. Sõltuvalt reportergeeni disainist võib lusiferaasi ekspressioon olla konstitutiivne või seotud signaalitee-spetsiifilise promootori aktiivsusega.

Neuro-2a-Luc rakke kasutatakse tavaliselt rakendustes, mis hõlmavad kasvajate kasvu jälgimist, suure läbilaskevõimega ravimite sõelumist, närvirakkude diferentseerumise analüüse ja ravivastuste reaalajas hindamist. Ksenotransplantaadi- ja metastaasimudelites võimaldab lusiferase-põhine bioluminestsentskuvamine jälgida mitteinvasiivselt kasvajate koormust ja haiguse progresseerumist suure tundlikkusega. Neuro-2a-põhiseid süsteeme kasutatakse laialdaselt ka neuronite morfoloogia, neurite väljakasvu, apoptoosi, oksüdatiivse stressi ja neurodegeneratiivsete haigustega seotud mehhanismide uurimiseks. Lusiferaasi modifikatsioon hõlbustab rakkude proliferatsiooni, tsütotoksilisuse, transkriptsioonilise aktiivsuse või signaalitee modulatsiooni kiiret kvantitatiivset analüüsi vastusena farmakoloogilistele või geneetilistele häiretele.

Nagu teiste inseneri teel loodud reporterrakuliinide puhul, võib Neuro-2a-Luc eksperimentaalne toimivus sõltuda sellistest teguritest nagu lusiferase konstrukti integratsioonikoht, promootori konfiguratsioon, substraadi ühilduvus ja reporterekspressiooni stabiilsus järjestikuste passaažide jooksul. Kõrgelt spetsialiseeritud eksperimentaalsete rakenduste jaoks võivad olla vajalikud täiendavad iseloomustavad andmed, sealhulgas üksikasjad lusiferase variandi, selektsioonimarkeri ja valideerimiskatsete kohta.

Kude
Perifeerne närvisüsteem
Haigus
Neuroblastoom
Sünonüümid
  • Neuro2A-Luc

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Neuronaalsed ja amoeboidsed tüvirakud

04Tunnused

Viide
Neuro-2a-Luc (Cytioni katalooginumber 305690)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)
Viirused
Ektromelia viirus (hiireviirus): negatiivne
Viirusresistentsus
Polioviirus 1
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Tubuliin, atsetüülkoliinesteraas

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.