Prejsť na obsah
Neuro-2a-Luc
Tkanivo
Periférny nervový systém
Choroba
Neuroblastóm
Synonymá
Neuro2A-Luc

Dokumenty

Neuro-2a-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Neuro-2a-Luc je derivát myšej neuroblastómovej bunky Neuro-2a (N2a), ktorý exprimuje luciferázu. Bunky Neuro-2a pochádzajú z tkaniva myšieho neuroblastómu odvodeného z neurálnej lišty a široko sa využívajú ako in vitro model pre diferenciáciu neurónov, štúdie neurotoxicity, výskum signálnej transdukcie a neuroonkologické skúmania. Stabilná expresia luciferázového reportéra umožňuje citlivú kvantitatívnu bioluminiscenčnú detekciu životaschopných buniek a bunkovej aktivity, vďaka čomu je Neuro-2a-Luc obzvlášť užitočný pre longitudinálne monitorovanie v experimentálnych systémoch in vitro aj in vivo. V závislosti od dizajnu reportéra môže byť expresia luciferázy konštitutívna alebo spojená s aktivitou promotora špecifického pre danú dráhu.

Bunky Neuro-2a-Luc sa bežne používajú v aplikáciách zahŕňajúcich sledovanie rastu nádorov, vysokokapacitné skríningy liekov, testy neurálnej diferenciácie a hodnotenie terapeutických odpovedí v reálnom čase. V modeloch xenotransplantátov a metastáz umožňuje bioluminiscenčné zobrazovanie na báze luciferázy neinvazívne monitorovanie nádorovej záťaže a progresie ochorenia s vysokou citlivosťou. Systémy odvodené od Neuro-2a sa tiež vo veľkej miere používajú na štúdium morfológie neurónov, rastu neuritov, apoptózy, oxidačného stresu a mechanizmov spojených s neurodegeneratívnymi ochoreniami. Modifikácia luciferázy uľahčuje rýchlu kvantitatívnu analýzu bunkovej proliferácie, cytotoxicity, transkripčnej aktivity alebo modulácie signálnych dráh v reakcii na farmakologické alebo genetické poruchy.

Rovnako ako v prípade iných modifikovaných reportérových bunkových línií, experimentálny výkon Neuro-2a-Luc môže závisieť od faktorov, ako je miesto integrácie konštruktu luciferázy, konfigurácia promotora, kompatibilita substrátu a stabilita expresie reportéra počas sériových pasáží. Pre vysoko špecializované experimentálne aplikácie môžu byť potrebné ďalšie charakterizačné údaje, vrátane podrobností týkajúcich sa variantu luciferázy, selekčného markéra a validačných testov.

Tkanivo
Periférny nervový systém
Choroba
Neuroblastóm
Synonymá
  • Neuro2A-Luc

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Typ bunky
Neuronálne a améboidné kmeňové bunky

04Identifikátory

Citácia
Neuro-2a-Luc (katalógové číslo Cytion 305690)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
Luc2 (svetluška, s optimalizovanými kodónmi)
Vírusy
Vírus ektromélie (myšie neštovice): negatívny
Odolnosť voči vírusom
Poliovírus 1
Reverzná transkriptáza
Negatívne
Produkty
Tubulín, acetylcholínesteráza

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.