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Neuro-2a-Luc
Tessuto
Sistema nervoso periferico
Malattia
Neuroblastoma
Sinonimi
Neuro2A-Luc

Documenti

Neuro-2a-Luc

Cell line · Codice prodotto 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

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01Informazioni generali

Descrizione

Neuro-2a-Luc è un derivato della linea cellulare di neuroblastoma murino Neuro-2a (N2a) che esprime la luciferasi. Le cellule Neuro-2a provengono da tessuto di neuroblastoma murino derivato dalla cresta neurale e sono ampiamente utilizzate come modello in vitro per la differenziazione neuronale, gli studi sulla neurotossicità, la ricerca sulla trasduzione del segnale e le indagini di neuro-oncologia. L'espressione stabile di un reporter luciferasi consente il rilevamento bioluminescente sensibile e quantitativo delle cellule vitali e dell'attività cellulare, rendendo Neuro-2a-Luc particolarmente utile per il monitoraggio longitudinale in sistemi sperimentali sia in vitro che in vivo. A seconda del design del reporter, l'espressione della luciferasi può essere costitutiva o collegata all'attività di un promotore specifico per un determinato percorso.

Le cellule Neuro-2a-Luc sono comunemente impiegate in applicazioni che coinvolgono il monitoraggio della crescita tumorale, lo screening farmacologico ad alta produttività, i test di differenziazione neurale e la valutazione in tempo reale delle risposte terapeutiche. Nei modelli di xenotrapianto e metastasi, l'imaging bioluminescente basato sulla luciferasi consente il monitoraggio non invasivo del carico tumorale e della progressione della malattia con elevata sensibilità. I sistemi derivati da Neuro-2a sono inoltre ampiamente utilizzati per studiare la morfologia neuronale, la crescita dei neuriti, l'apoptosi, lo stress ossidativo e i meccanismi associati alle malattie neurodegenerative. La modificazione con luciferasi facilita la rapida analisi quantitativa della proliferazione cellulare, della citotossicità, dell'attività trascrizionale o della modulazione dei percorsi in risposta a perturbazioni farmacologiche o genetiche.

Come per altre linee cellulari reporter ingegnerizzate, le prestazioni sperimentali di Neuro-2a-Luc possono dipendere da fattori quali il sito di integrazione del costrutto della luciferasi, la configurazione del promotore, la compatibilità del substrato e la stabilità dell'espressione del reporter nel corso di passaggi seriali. Per applicazioni sperimentali altamente specializzate potrebbero essere necessari ulteriori dati di caratterizzazione, inclusi dettagli riguardanti la variante della luciferasi, il marcatore di selezione e i test di validazione.

Tessuto
Sistema nervoso periferico
Malattia
Neuroblastoma
Sinonimi
  • Neuro2A-Luc

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tipo di cellula
Cellule staminali neuronali e ameboidi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Neuro-2a-Luc (codice catalogo Cytion 305690)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Luc2 (lucciola, ottimizzata a livello di codoni)
Virus
Ectromelia virus (vaiolo del topo): negativo
Resistenza ai virus
Poliovirus 1
Trascriptasi inversa
Negativo
Prodotti
Tubulina, acetilcolinesterasi

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.