Tartalomra ugrás
Neuro-2a-Luc
Szövet
Perifériás idegrendszer
Betegség
Neuroblasztóma
Szinonimák
Neuro2A-Luc

Dokumentumok

Neuro-2a-Luc

Cell line · Termékszám 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Neuro-2a-Luc a Neuro-2a (N2a) egér neuroblasztóma sejtvonal luciferázt expresszáló származéka. A Neuro-2a sejtek egér idegcsíra-eredetű neuroblasztóma szövetből származnak, és széles körben használják őket in vitro modellként idegsejt-differenciálódás, neurotoxicitási vizsgálatok, jelátviteli kutatások és neuroonkológiai vizsgálatok során. A luciferáz riporter stabil expressziója lehetővé teszi az életképes sejtek és a sejtaktivitás érzékeny, kvantitatív biolumineszcens detektálását, ami a Neuro-2a-Luc-ot különösen hasznossá teszi mind az in vitro, mind az in vivo kísérleti rendszerekben történő longitudinális monitorozáshoz. A riporter kialakításától függően a luciferáz expressziója konstitutív lehet, vagy kapcsolódhat egy adott jelátviteli útvonalhoz.

A Neuro-2a-Luc sejteket gyakran alkalmazzák tumor növekedésének nyomon követésére, nagy áteresztőképességű gyógyszerszűrésre, idegsejt-differenciálódási vizsgálatokra és a terápiás válaszok valós idejű értékelésére. Xenotranszplantációs és metasztázis modellekben a luciferáz-alapú biolumineszcens képalkotás lehetővé teszi a tumorterhelés és a betegség progressziójának nem invazív, nagy érzékenységű monitorozását. A Neuro-2a-ból származó rendszereket széles körben használják az idegsejtek morfológiájának, a neuritok növekedésének, az apoptózisnak, az oxidatív stressznek és a neurodegeneratív betegségekkel kapcsolatos mechanizmusok tanulmányozására is. A luciferáz-módosítás megkönnyíti a sejtproliferáció, a citotoxicitás, a transzkripciós aktivitás vagy az útvonal-moduláció gyors kvantitatív elemzését farmakológiai vagy genetikai zavarokra adott válaszként.

Más módosított riporter sejtvonalakhoz hasonlóan a Neuro-2a-Luc kísérleti teljesítménye olyan tényezőktől függhet, mint a luciferáz-konstruktum integrációs helye, a promóter konfigurációja, a szubsztrát kompatibilitása és a riporter expresszió stabilitása sorozatos passzálás során. Magasan specializált kísérleti alkalmazásokhoz további jellemző adatokra lehet szükség, beleértve a luciferáz-variánsra, a szelekciós markerekre és a validációs vizsgálatokra vonatkozó részleteket.

Szövet
Perifériás idegrendszer
Betegség
Neuroblasztóma
Szinonimák
  • Neuro2A-Luc

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Sejttípus
Neuronális és amőboid őssejtek

04Azonosítók

Hivatkozás
Neuro-2a-Luc (Cytion katalógusszám: 305690)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)
Vírusok
Ectromelia vírus (egérhimlő): negatív
Vírusrezisztencia
Poliovírus 1
Fordított transzkriptáz
Negatív
Termékek
Tubulin, acetilkolinészteráz

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.