Pereiti prie turinio
Neuro-2a-Luc
Audinys
Periferinė nervų sistema
Liga
Neuroblastoma
Sinonimai
Neuro2A-Luc

Dokumentai

Neuro-2a-Luc

Cell line · Prekės numeris 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

„Neuro-2a-Luc“ yra pelės neuroblastomos ląstelių linijos „Neuro-2a“ (N2a) atmaina, kurioje ekspresuojama liuciferazė. „Neuro-2a“ ląstelės yra kilusios iš pelės nervinio griovelio kilmės neuroblastomos audinio ir plačiai naudojamos kaip in vitro modelis neuronų diferenciacijai, neurotoksinio poveikio tyrimams, signalų perdavimo tyrimams bei neuroonkologiniams tyrimams. Stabili luciferazės reporterio ekspresija leidžia jautriai ir kiekybiškai bioluminescenciniu būdu aptikti gyvybingas ląsteles ir ląstelių aktyvumą, todėl Neuro-2a-Luc yra ypač naudingas ilgalaikiam stebėjimui tiek in vitro, tiek in vivo eksperimentinėse sistemose. Priklausomai nuo reporterio konstrukcijos, luciferazės ekspresija gali būti konstitucinė arba susieta su konkrečiam signalų perdavimo keliui būdinga promotoriaus aktyvumu.

Neuro-2a-Luc ląstelės dažnai naudojamos taikymuose, susijusiuose su naviko augimo stebėjimu, didelio našumo vaistų atranka, nervų ląstelių diferenciacijos tyrimais ir terapinio atsako vertinimu realiuoju laiku. Ksenotransplantacijos ir metastazių modeliuose liuciferazės pagrįstas bioluminescencinis vaizdavimas leidžia neinvaziniu būdu stebėti naviko apkrovą ir ligos progresavimą su dideliu jautrumu. Neuro-2a pagrįstos sistemos taip pat plačiai naudojamos neuronų morfologijos, neuritų augimo, apoptozės, oksidacinio streso ir su neurodegeneracinėmis ligomis susijusių mechanizmų tyrimams. Liuciferazės modifikacija palengvina greitą ląstelių proliferacijos, citotoksiškumo, transkripcinės aktyvumo arba signalinio kelio moduliacijos, reaguojant į farmakologinius ar genetinius sutrikimus, kiekybinę analizę.

Kaip ir kitų modifikuotų reporterinių ląstelių linijų atveju, Neuro-2a-Luc eksperimentiniai rezultatai gali priklausyti nuo veiksnių, įskaitant luciferazės konstrukto integracijos vietą, promotoriaus konfigūraciją, substrato suderinamumą ir reporterio ekspresijos stabilumą per serijinius pasėlius. Labai specializuotiems eksperimentiniams taikymams gali būti reikalingi papildomi charakteristikų duomenys, įskaitant informaciją apie luciferazės variantą, atrankos žymeklį ir patvirtinimo tyrimus.

Audinys
Periferinė nervų sistema
Liga
Neuroblastoma
Sinonimai
  • Neuro2A-Luc

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Ląstelių tipas
Neuronų ir ameboidinės kamieninės ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
Neuro-2a-Luc (Cytion katalogo numeris 305690)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Luc2 (vabalas, kodonų optimizuotas)
Virusai
Ektromelijos virusas (pelių raupai): neigiamas
Atsparumas virusams
Poliovirusas 1
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas
Produktai
Tubulinas, acetilcholinesterazė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.